应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电泳中个条件与蛋白聚体的关系
51/1返回列表
查看: 1522  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Allen206

银虫 (小有名气)

[交流] 电泳中个条件与蛋白聚体的关系 已有4人参与

我有个问题搞不懂啊，电泳中各个条件与蛋白是否解聚的关系，有以下几点：
1.样品煮沸能使蛋白解聚么？就是由亚基组成的蛋白解开成为单体
2.SDS能使由亚基组成的蛋白解聚么？
3.SDS-PAGE中，很多人用含有2ME,SDS和    没有2ME,有SDS的样品处理液，根据结果断定蛋白的亚基组成，这样对么？
4.如果SDS能使蛋白解聚，那么是不是只有用Native-PAGE才能鉴定蛋白的真实分子量啊？
小妹是新人，希望同仁们指点啊，先谢过了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
不想说什么，，，，
1楼 2012-12-25 16:16:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by Allen206 at 2012-12-26 12:26:26
非常感谢您的解答，如果我要判断一个蛋白是否聚体，是不是可以用Native-PAGE,然后样品处理液一个用没有SDS和2ME的， 另外一个样品条件用有SDS和2ME再加煮沸，您看这样可以吗？
    还有一个问题就是Native-PAGE是 ...

有很多做native-PAGE的方法。如果只是普通的电泳缓冲体系不加SDS，蛋白质是靠本身所带电荷移动，而且对pI小的蛋白不能向下移动，所以局限性很强。目前比较好用的是blue-native和改进的clear-native。主要是在负极缓冲液和样品中加入带负电荷的物质，使蛋白质可以较顺利地从负极跑向正极。做native-page也有marker的，分子量可以大致参考的。
赞一下 回复此楼
7楼2012-12-26 12:58:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1. 煮沸样品可以是蛋白质变性。如果buffer中没有象SDS之类的去垢剂不能使亚基之间的作用完全解开。
2. SDS可以破坏亚基之间的疏水作用和氢键，从而使多亚基复合体解聚。
3. 加入巯基乙醇的目的是把二硫键还原成-SH。有些蛋白质会靠二硫键形成二聚体，或者有亚基之间二硫键，光靠SDS不能使其完全解开。
4. SDS-PAGE来判断蛋白质的分子量实际上的单体亚基的分子量。如果你需要确定多亚基组成的蛋白复合体的分子量，加入SDS会破坏亚基之间的作用，只有在native条件下做。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-12-25 17:09:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mguo15

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看来你喜欢电泳，可以用尿素梯度与胶梯度的混合胶，得到非常好的蛋白解聚曲线。不过制胶有点难度，可以了解它，不推荐你做。
SDS 对膜蛋白有保护作用，所以你的问题最好一对一而定。cicelyzh 的解答还是比较标准的。
Native gel not the best. 其他的色谱之类更好。不过PAGE肯定是最便宜的。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2012-12-26 00:02:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果你蛋白本身就是单体而且可以单体稳定存在，那变性胶是没有问题的
native可以判断天然存在形态。是对结构的判断，就是说你变性胶的分子量可能是native的一部分
通常蛋白在高温态很不稳定
赞一下 回复此楼
修身、齐家、治国、平天下
4楼2012-12-26 11:18:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +5 瞬息宇宙 2026-08-12 5/250 2026-08-13 07:13 by athenadai219
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +8 majunge000 2026-08-10 9/450 2026-08-12 22:17 by 虫友是什么虫
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +10 Tide man 2026-08-11 10/500 2026-08-12 20:59 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭