24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 11647  |  回复: 54
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

清风寨

银虫 (小有名气)

[求助] 将两个基因串联到启动子下面,两个基因都能表达么?

想请问各位大侠,如果我将两个基因GFP、neo基因串联到A3启动子下游,两个基因都是完整的阅读框,中间用内切酶Not I酶切连接。下游再加上加尾信号和反向重复序列。这样子GFP和neo两个基因都能表达么?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子问题及解决方案汇总 细胞生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

冷风过心变热
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
清风寨: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-23 15:45:35
一个Promoter可以控制多个蛋白的转录。但控制多长要看Promoter的强度,在PKS的基
因中,一个promoter控制多个蛋白的表达是很正常。
stop codon是在翻译这个环节来决定蛋白的终止跟promoter控制的转录是分子生物学中两个不同的事件。promoter负责DNA变成mRNA的,如果如够强的promoter,使连续3-5个基因发生转录是一点问题都没有的。
比如 pET28,
我们在NdeI和XhoI位点克隆一个基因,在基因的后面引入一个SpeI位点,将另一个已
经在pET28的基因用XbaI和SpeI切下来克隆到前一个克隆的SpeI位点上。两个基因先后promoter T7控制。但是每个基因有自己的RBS(ribosome binding site)和stop Codon,在翻译的时候核糖体会识别这一头一尾两个位点,表达出两个蛋白。强度肯定是越排在后面的越弱,但是每个蛋白翻译的速率和半衰期不一样,表达出的量也不同。
修身、齐家、治国、平天下
46楼2012-12-23 09:33:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 清风寨 的主题更新
信息提示
请填处理意见