| 查看: 7365 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
porphybaby金虫 (正式写手)
|
[求助]
如何做 Western blot 以及RT-PCR 的加药处理时间梯度？细胞数量如何统一？
|
||
|
最近一直纠结一个问题。 我用Hela细胞如何做Western blot的时间梯度？ 现在我一直都是铺培养皿之后细胞贴壁后加药处理72h。然后裂细胞提蛋白，做的是加药浓度梯度。 一直想做时间梯度。但不知怎么做。 本身是想同时铺培养皿，然后加药后6h，24h，48h，72h分别拿去裂解提蛋白。再一起做WB。但又想到一个问题——关于“平摊到每个细胞上的药物量”的问题。 之前做浓度梯度，加药的时候细胞数量是一样的。72h之后它们大致也会长到80%~90%。 不过我之前铺的都很稀。 那如果是这样，岂不是我6h、24h 那些 细胞那么少，怎么跟48h 72h的比呢？ 我怎么才能控制到24h，48h，72h时间点我收细胞的时候，细胞数量大体一样？ 还是说，这个其实不影响结果? |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生化实验经验积累 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有159人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 如何用植物细胞做western blot
已经有3人回复
- western blot 细胞裂解时间
已经有7人回复
- 植物叶片该如何长期保存，以后才能适应做western bloting 和RT-PCR？
已经有4人回复
- 【求助/交流】做培养细胞的RT-PCR，β-actin内参出现两个条带，求原因。
已经有10人回复
- 【求助/交流】做western blot时，细胞的要求
已经有12人回复
porphybaby
金虫 (正式写手)
- 应助: 89 (初中生)
- 金币: 948.3
- 散金: 16
- 红花: 6
- 帖子: 395
- 在线: 87小时
- 虫号: 1162143
- 注册: 2010-12-04
- 性别: GG
- 专业: 化学生物学与生物有机化学
6楼2012-12-20 23:33:07
porphybaby
金虫 (正式写手)
- 应助: 89 (初中生)
- 金币: 948.3
- 散金: 16
- 红花: 6
- 帖子: 395
- 在线: 87小时
- 虫号: 1162143
- 注册: 2010-12-04
- 性别: GG
- 专业: 化学生物学与生物有机化学
2楼2012-12-19 22:28:09
porphybaby
金虫 (正式写手)
- 应助: 89 (初中生)
- 金币: 948.3
- 散金: 16
- 红花: 6
- 帖子: 395
- 在线: 87小时
- 虫号: 1162143
- 注册: 2010-12-04
- 性别: GG
- 专业: 化学生物学与生物有机化学
3楼2012-12-20 14:55:03
sarah-miao
银虫 (正式写手)
- 应助: 40 (小学生)
- 金币: 184.6
- 散金: 116
- 红花: 2
- 帖子: 753
- 在线: 154.4小时
- 虫号: 1462411
- 注册: 2011-10-26
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
4楼2012-12-20 15:45:29
20
投票: