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shijunyu0618

至尊木虫 (著名写手)

应助: 73 (初中生)
金币: 12012.2
红花: 3
帖子: 1314
在线: 973.8小时
虫号: 999195
注册: 2010-04-17
专业: 无机材料化学

[求助] WB条带周围黑黑的一团！！！！！

最近做ＷＢ，发现每次条带周围都有黑黑的一团，不知道是怎么回事。
请大虾指点！

我用的一抗１:５０００和二抗１:２００００，都是ａｂｃａｍ的。
显色液是pierce，SuperSignal West Pico Chemiluminescent Substrate。

３％的ＢＳＡ封闭１．５小时。
一抗（用３％的ＢＳＡ配制）４度过夜
ＴＢＳＴ洗３次，每次２０分钟
孵二抗１．５小时
ＴＢＳＴ洗３次，每次２０分钟
显色

未命名.jpg

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1楼2012-12-18 16:55:23

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hallen6891

新虫 (小有名气)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 266
红花: 1
帖子: 97
在线: 34.8小时
虫号: 2154369
注册: 2012-11-29
性别: GG
专业: 肿瘤生物治疗

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-12-18 20:08:36
shijunyu0618: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-12-20 14:47:58

你用5%脱脂奶粉封闭过夜试一试，而且一抗和二抗的稀释液也换成含5%脱脂奶粉的TBST，而且我看你显色液是用的超敏的，建议你用一下中敏的试哈，同时降低一下上样量，一抗和二抗孵育之后的洗涤时间也可以增加至1.5-2h。希望对你有帮助，我最近也在做WB，加油，试验顺利！

生活要好好过！

2楼2012-12-18 17:14:29

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