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lvanmorison

禁虫 (初入文坛)

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porphybaby

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by lvanmorison at 2012-12-14 18:28:15
用PBS洗后,吸干净PBS,不加入裂解液,直接刮下来?
还是不吸干PBS,利用剩余的PBS来刮细胞?
谢谢!...

我一般是 再加入一部分新的PBS 之后直接刮下来

你PBS洗的话,就直接倒掉就可以了,不用吸得很干净。因为你之后还要再离心,那里会还有一次机会给你吸尽残留的PBS。
8楼2012-12-14 23:48:56
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查看全部 9 个回答

diandong

禁虫 (著名写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

2楼2012-12-13 17:49:05
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porphybaby

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助和交流! 2012-12-13 21:02:19
必须要先加loading buffer 然后再煮的吧。。。不能直接煮的吧~~~

我一般是先弃去培养基以及死掉的细胞,然后用预冷的PBS洗两遍。再用细胞刮铲刮细胞,收集到EP管中,然后再离心。之后加100 uL裂解液,冰上裂解30分钟,其间隔十分钟就用涡旋剧烈震荡30秒。最后12000转离心 收集上清。

加完loading buffer之后混匀然后再煮5分钟,上样。
3楼2012-12-13 20:41:56
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tinycuke

新虫 (初入文坛)

想问一下,加loading煮5min上样,剩下的下次还可以再用么?如果可以又能放多久呢?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2012-12-14 00:31:00
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