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chem_dgy

铜虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 86.8
帖子: 210
在线: 150.6小时
虫号: 1198687

[交流] 质谱分析蛋白质的问题

求高人指点，用EESI-MS测定大分子量蛋白质的常用溶剂，萃取剂，以及试验相关的各个参数，以供参考。

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1楼 2012-12-11 21:34:33

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cpn

木虫 (正式写手)

ACI: 2
应助: 21 (小学生)
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虫号: 588589

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
chem_dgy: 金币+5 2012-12-13 11:10:51

蛋白质没有所谓的萃取剂吧？看你样品的状态，如果是高盐溶液，必须要除盐，除盐用HPLC C4，C8柱或者用milipore的ziptip C18富集蛋白，有一套通用的procedure。ESI必须要除难挥发性盐除的很干净，否则不仅信号很糟糕，还污染质谱。
溶剂一般是50%H2O，50%ACN或MeOH，再加0.1%甲酸帮助离子化。当然如果你的蛋白对酸非常不稳定的话，也可以考虑是不是要加点挥发性缓冲盐。