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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 关于蛋白质的鉴定定量什么之类的问题~((T_T))~
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
10楼: Originally posted by rebow at 2012-12-11 22:49:36
同学生不能用BCA和SDS-PAGE,,
因为BCA和SDS-PAGE是determine all the protein,,
而我们只要那个specific的protein.....
还有这样分的么...
然后同学们说用什么crystallization,,质谱,,之类的...
...

这样分没错啊，楼主没有理解前面给你写的东西么？麻烦你还是抽空看看书吧。
BCA只能检测在样品中总共有多少蛋白，给出的结果是蛋白含量，mg/ml之类，SDS-PAGE可以讲蛋白按分子量大小分开，这样可以供推断是否有你需要分子量的蛋白在其中。如果只要那个特殊带HIS-tag的蛋白，鉴定可以用western，纯化可以过柱子（前两天我自己的一个蛋白用Ni-NTA Resin纯化）。
你同学讲的是针对什么的？质谱的话可以搞清精确分子量，同时提供一系列信息供鉴定。结晶化的话，需要纯化蛋白，通过结晶可以获得蛋白结构，
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
11楼2012-12-12 00:01:04
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