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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR为什么需要2条引物？
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看天

木虫 (知名作家)

[交流] PCR为什么需要2条引物？

为什么需要两条才有特定片段出来？
不要告诉我一条会怎么样，我想知道为什么两条会这样。
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1楼 2012-12-07 22:03:58
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看天: 金币+5, 为什么一条链复制到另一个引物结合的区域就停止复制了呢 2012-12-07 23:32:08
引用回帖:
5楼: Originally posted by 看天 at 2012-12-07 22:50:33
我的问题是为什么两条引物就只能把他们之间序列P出来

这个问题问的。。。。。
DNA是有两条反向互补的链组成，PCR时退火后，引物与模板结合，然后由5‘向3’方向合成，新合成的两条链经过退火后就形成新的DNA双链分子。

去看PCR原理吧。。。一言两语解释不清楚，去看看Kary Mullis当年发明PCR的故事，对于你就容易理解了哈

这个百度文库文章可能对你有用：
http://wenku.baidu.com/view/08e02603cc17552707220820.html

楼主可以去试想，这两条引物是设计在两条链上的，如果设计在一条链上，PCR还能成功吗？
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7楼2012-12-07 23:14:53
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酶切专家

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
学习一下PCR的基本原理就明白了
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3楼2012-12-07 22:40:33
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看天: 金币+5, 谢谢回答，我的问题是为什么两条引物就只能把他们之间序列P出来？ 2012-12-07 22:50:09
amisking: 回帖置顶 2012-12-08 18:55:23
两条引物是指数扩增，即PCR合成的新链可以作为下一轮PCR的模板，假设你其实模板DNA的量为a, 你PCR循环为x，那么X个循环结束后，你的目标DNA的量为 a * 2^x(这里假设扩增效率是2)

一条引物是线性扩增，模板始终是你加入的DNA模板，而且产物都是单链的，如果还是上述条件，X个循环结束后，你的目标DNA的量为 x*a，且为单链，扩增后的得到的DNA量天壤之别

两条引物扩增和单引物扩增在实际中都有应用
当你做克隆时，你需要双引物扩增，一因为你需要足够量的DNA，二单链的DNA，你克隆不上载体
当在做测序是，就要当引物扩增了
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4楼2012-12-07 22:45:07
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看天

木虫 (知名作家)
我的问题是为什么两条引物就只能把他们之间序列P出来
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5楼2012-12-07 22:50:33
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