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hraikeyan

金虫 (小有名气)

[求助] 有关酶学性质温度稳定性实验

我现在在做酶学性质研究,目前确定该酶的最适温度是100℃。但在做温度稳定性实验中有个概念一直没弄清楚。
问题:我选40℃,60℃,80℃,100℃这几个点为测定温度。我是先分别在这几个温度点放置一段时间,然后再在相对应的温度下与底物反应?还是先在这几个温度点放置一段时间,再在100℃下与底物反应?
拜托各位啦
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nothing isimpossible
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-10 13:59:38
不知道楼主是为了测定什么,如果酶100度稳定而且活性最高,你放在40,60,80度对它的活性不会有影响啊。

我的理解是,整个酶反应体系应该放在40度,60度,80度,100度,然后作活性和1/T的曲线。

如果测pH的稳定性,是用MTCN buffer, 这是为了保证离子强度一致,你把MTCN调整到你需要的pH,然后分别测,然后作活性和pH曲线,看是一个拐点还是两个拐点,然后推测活性中心的氨基酸残基。
行至水穷处,坐看云起时
8楼2012-12-10 09:45:11
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dmzha

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hraikeyan: 金币+5 2012-12-07 14:53:29
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-07 16:32:55
应该是先在这几个温度点放置一段时间,再在100℃下与底物反应。
2楼2012-12-07 14:51:56
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hraikeyan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dmzha at 2012-12-07 14:51:56
应该是先在这几个温度点放置一段时间,再在100℃下与底物反应。

谢谢啦
nothing isimpossible
3楼2012-12-07 14:54:38
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dmzha at 2012-12-07 14:51:56
应该是先在这几个温度点放置一段时间,再在100℃下与底物反应。

请问你是做过这个的吧?确定吗?看来我得重做了……pH稳定性你是怎么弄的呢 我现在是把酶放置在不同pH下,100度(最适温度),然后和底物反应(也是100度),这样行吗?谢谢你了!!!
4楼2012-12-07 15:49:37
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