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有关LAMP的交流。。。
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养活它
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有关LAMP的交流。。。
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LAMP反应体系中buffer一般加多少?
dNTP要求25ul体系中终浓度是2.5mmol/l,可是我现在买回来的dNTP浓度就是这么多,该怎么取?
Bst酶现在是8000U/ml,可是文献上要求是8U,两者单位不统一啊。。。怎么办?
还有模板最终是用多少TE溶解的(其中加Rnase吗)?
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2012-12-06 16:07:39
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晴晴12352
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【答案】应助回帖
引用回帖:
13楼
:
Originally posted by
songxuebai
at 2013-05-19 16:35:59
LAMP引物设计有专门的在线软件http://primerexplorer.jp/elamp4.0.0/index.html;有了菌株后具体流程:
1、培养菌株,提取DNA;
2、建立体系,优化体系;
3、LAMP扩增
4、检测
亲,想请教一下,LAMP假阳性问题怎么解决的,而且有时出现了假阳性就再也做不出来了,气溶胶污染有这么严重吗?
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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15楼
2014-08-02 16:37:00
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
buffer这个应该根据浓度确定就行了吧,公司有卖高浓度dNTP的,我记得好像是10的,你找目录看一下就行了,单卖的;酶的问题更简单,肯定是要稀释的啊,需要8U,你加8微升不就正好吗
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2楼
2012-12-06 18:03:58
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zdfang83
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【答案】应助回帖
忘了模板的问题,我们实验室一般是用无菌去离子水溶解的,TE中有的东西对酶不好,平时都是用水溶解的。
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3楼
2012-12-06 18:05:10
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songxuebai
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
我做了很多次LAMP实验,一般10xbuffer加2.5ul就可以了,8000U/ml的BstDNA酶一般加1ul,引物浓度一般FIP/BIP:F3/B3=8:1,TE和超纯水都可以的。希望对你有帮助。
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养活它
4楼
2012-12-07 19:55:35
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