24小时热门版块排行榜    

查看: 2247  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

honey倩

铜虫 (小有名气)

[求助] 乳酸菌质粒提取出现了一些问题

做克隆的,连接载体转化到乳酸菌之后,提取质粒验证,现在就是说什么也提不出东西来了,(我们是先加一定的溶菌酶的溶液I溶液处理之后,再加溶液II溶液III,然后再醇沉),醇沉之后离心发现EP管底部会有白色的东西量也不少,晾干加水溶解之后,直接跑电泳一条带也没有,只有最下边挺亮的一片,大概就是RNA了,现在就是不知道是哪里出了问题了,现在所用的试剂都重新换了,还是这个问题,很是郁闷
请教一下各位,大家提取乳酸菌的质粒是用什么方法,之前按照《乳酸菌天然质粒提取方法的优化》中的方法做过也没做出来,就一直按照我们的方法做了,现在又出现问题了,还真是挺犯愁的,希望大家帮帮忙
我想做验证,做菌落PCR这个假阳性就是太高还是不行,还是得提…
下边那个图就是提的情况,靠近maker那个泳道应该就是提出来的了,也是之前提的

1.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

当你的眼泪忍不住要流出来的时候,睁大眼睛,千万别眨眼,你会看到世界由清晰到模糊的全过程~~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Qp12345

新虫 (初入文坛)

你的问题解决了吗,怎么解决的啊,我最近也遇到了跟你一样的问题

发自小木虫IOS客户端
6楼2018-08-12 08:17:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

紫剑_woniu

新虫 (初入文坛)

请问楼主的问题解决了吗
2楼2013-05-03 16:00:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huoquanlike

新虫 (初入文坛)

将连接产物转化到合适的大肠杆菌里吧!提取质粒,酶切鉴定,测序,再转入到乳酸菌。我之前做也是提不出质粒在乳酸菌里。或者你可以把在乳酸菌里提取出质粒转入到大肠杆菌中。因为可能这个质粒在乳酸菌里是低拷贝的!祝你好运!
3楼2015-07-03 17:13:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郭玉肖

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by huoquanlike at 2015-07-03 17:13:34
将连接产物转化到合适的大肠杆菌里吧!提取质粒,酶切鉴定,测序,再转入到乳酸菌。我之前做也是提不出质粒在乳酸菌里。或者你可以把在乳酸菌里提取出质粒转入到大肠杆菌中。因为可能这个质粒在乳酸菌里是低拷贝的! ...

请问你提取乳酸菌质粒时溶菌酶用什么缓冲液溶的呢?
4楼2017-07-25 21:34:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 08工学调剂 +13 用户573181 2026-03-20 18/900 2026-03-25 22:00 by zbssa
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +3 地球绕着太阳转 2026-03-23 3/150 2026-03-25 19:10 by 雾散后相遇lc
[考研] 321求调剂 +3 璞玉~~ 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:07 by Zhanglab-TJU
[考研] 0703化学求调剂 +6 奶油草莓. 2026-03-22 7/350 2026-03-25 10:00 by shangxh
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[考研] 070300化学求调剂 +9 苑豆豆 2026-03-20 9/450 2026-03-24 17:15 by licg0208
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程(085601) +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见