| 查看: 1714 | 回复: 4 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
tankleiming新虫 (小有名气)
|
[求助]
puc18 载体的疑问
|
|
|
大家好啊== 我问下takara 的puc18载体的目的片段到底是连载什么位置？说明书上也没有， 酶切验证是否连接应该怎么验证？ 用什么酶？ 懂行的回答 ，谢谢大家啊，我刚开始做分子，不大了解 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有54人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 【SOS】PUC18 SphI和PstI 酶切
已经有7人回复
- 连接前等摩尔加入两个片段的问题
已经有6人回复
- 关于常用载体通用引物的问题
已经有5人回复
- pMD18-T载体与目的基因连接后构建的质粒能通过接合转移到一些难以转化的细菌中吗？
已经有8人回复
- 酶切问题
已经有11人回复
- 虚心请教关于平—粘末端的连接问题
已经有18人回复
- Eco88l单酶切pUC18，失败原因及解决办法？？？？
已经有4人回复
- pUC18和pBR322质粒的装载量分别是多少？
已经有8人回复
- pMD19与pUC19是否可以作为表达载体
已经有8人回复
- 重大问题，有谁知道pMD18-t等Amp+抗性载体中AmpR的启动子序列是什么？
已经有3人回复
- 有关pUC18为载体的融合蛋白的纯化！
已经有3人回复
- puc19能作为表达载体用吗/
已经有8人回复
- pET系列、pUC18 、19 、pMD19T质粒图谱大全！
已经有607人回复
- 【求助/交流】为什么pUC18和DNA片段经过Eco1和Hind3酶切后无法连接
已经有3人回复
- 【求助/交流】PMD18-T载体是什么类型？
已经有5人回复
1514132
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 10220.6
- 散金: 1000
- 红花: 15
- 帖子: 2573
- 在线: 194.1小时
- 虫号: 927225
- 注册: 2009-12-13
- 性别: MM
- 专业: 性传播疾病
3楼2012-12-03 21:59:16
1514132
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 10220.6
- 散金: 1000
- 红花: 15
- 帖子: 2573
- 在线: 194.1小时
- 虫号: 927225
- 注册: 2009-12-13
- 性别: MM
- 专业: 性传播疾病
2楼2012-12-03 21:58:48
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
4楼2012-12-04 08:12:01
fayzhao
金虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 809.6
- 帖子: 97
- 在线: 106.4小时
- 虫号: 1573744
- 注册: 2012-01-11
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tankleiming: 金币+20 2012-12-18 17:33:18
感谢参与，应助指数 +1
tankleiming: 金币+20 2012-12-18 17:33:18
|
1 说明书上有载体图谱呀，有T克隆位点，因为PCR的时候会在你的基因3‘末端加上A，T载体就是根据T和A配对进行连接的。你的目的基因上的A和载体上的T配对，这样目的基因就连接到载体里面了。T克隆位点是经过酶切得到的，这个你不用考虑，你可以仔细看下那个图谱。 2 酶切验证，一种是自己设计引物时加上酶切位点，这个酶切位点一定要是你的序列中没有的酶切位点，最好载体上也没有，这样克隆之后进行双酶切，就会把你的目的片段和载体分离开，电泳验证大小即可。另一种就是利用载体上的酶切位点进行双酶切，这个我没有研究过，你可以查查资料看。 |
5楼2012-12-04 13:34:58
20