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yicao917

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[交流] western blot 烧膜是什么原因

western显色后像actin这样强的条带往往会在膜上留下一条褐色肉眼可见的条带，请问这是什么原因？对结果有没有影响？

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1楼2012-12-03 12:57:10

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porphybaby

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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-03 16:39:09

其实是没有的~~~而且这个黄斑的出现就是说明你的条带够强，蛋白够多，信号是很好的。

它是由于你蛋白的浓度太高，ECL的化学发光反应进行得太快，然后又来不及扩散所致。

一般不会影响结果的，但是你就要注意曝光时间的控制了~~~

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2楼2012-12-03 15:13:40

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yicao917

木虫 (小有名气)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by porphybaby at 2012-12-03 15:13:40
其实是没有的~~~而且这个黄斑的出现就是说明你的条带够强，蛋白够多，信号是很好的。

它是由于你蛋白的浓度太高，ECL的化学发光反应进行得太快，然后又来不及扩散所致。

一般不会影响结果的，但是你就要注意曝 ...

是ECL的产物来不及扩散吗？若是能扩散的话为何用TBST或者甲醇都不能洗掉呢？

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3楼2012-12-04 00:33:02

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