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wuxiaoyan06

金虫 (小有名气)

[求助] 扩增已知序列旁邻的未知DNA序列

本人最近在扩增一个未知基因,已经得到了它其中的一个片段,想知道它两端的序列,想请教哈用TAIL-PCR方法(hiTAIL-PCR)能否扩增出我想要的条带,不知道这个方法行不行得通,效率高不,谢谢各位指点了!
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wuxiaoyan06

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-30 15:34:09
问题需要进一步描述清楚,你是要扩增cDNA序列还是基因组序列?
如果是cDNA序列,可以做RACE,5‘和3’ RACE
如果是基因组序列,可以用iPCR来做

希望对你有用

想问哈iPCR具体怎么弄,本人未做过这方面的,不是很懂,还愿指点,谢谢了!
4楼2012-11-30 16:32:48
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
问题需要进一步描述清楚,你是要扩增cDNA序列还是基因组序列?
如果是cDNA序列,可以做RACE,5‘和3’ RACE
如果是基因组序列,可以用iPCR来做

希望对你有用
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2012-11-30 15:34:09
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wuxiaoyan06

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-30 15:34:09
问题需要进一步描述清楚,你是要扩增cDNA序列还是基因组序列?
如果是cDNA序列,可以做RACE,5‘和3’ RACE
如果是基因组序列,可以用iPCR来做

希望对你有用

我是扩增某个基因的全长,提的是DNA,请问哈iPCR是什么哦,能不能讲明白点呢,谢谢了!
3楼2012-11-30 15:40:52
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titus0805

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不建议作ipcr,还要摸条件,现在不缺钱,买宝生物的TAIL-pcr试剂盒,稳定性比较好,但是侧翼能扩多长就看运气了。
5楼2012-11-30 20:50:58
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