24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1384  |  回复: 22
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Cllair

金虫 (小有名气)

[求助] pcr实验相关

我想从青霉里面克隆菊粉酶基因,之前退火在42度的时候做出来过,但是觉得条带浅没有回收,但是不知道为什么后来重复了几百组实验都没有在做出来过。引物的Tm值是51.65,我从40到60度来来回回的试了很多遍了。为什么会做不出来了呢?麻烦大家江湖急救一下,给的指导吧。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

有今生没来世,且行且珍惜。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bloodwar

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
再就是增加循环数,用好的酶
3楼2012-11-29 05:06:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答

catmihzh

木虫 (小有名气)

虫虫特攻队队长

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是模板问题,不纯或者是降解了也可能是引物降解了,如果重新制备模板和稀释引物后还p不出来,建议尝试降落pcr

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
[url=http://weibo.com/2152924384?s=6uyXnP][img]http://service.t.sina.com.cn/widget/qmd/2152924384/13d43368/7.png[/img][/url]
2楼2012-11-29 00:23:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这种情况,果断重新设计引物。类似情况多次发生在我们实验室,引物不够特异或质量不好很容易造成这种情况
4楼2012-11-29 08:54:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunlk

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
别摸;了 ,就是引物不好使呗,重新设计引物
很给力
5楼2012-11-29 11:09:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +9 柳溪边 2026-03-26 9/450 2026-03-31 12:16 by oooqiao
[考研] 289求调剂 +6 BrightLL 2026-03-29 6/300 2026-03-31 11:22 by oooqiao
[考研] 求调剂 +4 研s. 2026-03-25 4/200 2026-03-31 10:05 by fmesaito
[考研] 085600材料与化工调剂 +16 kikiki7 2026-03-30 16/800 2026-03-31 10:03 by 氯化亚硝酰
[考研] 本科211总分289,08工学真心求调剂 +3 utopiaE 2026-03-30 3/150 2026-03-30 23:42 by ms629
[考研] 085701环境工程求调剂 +11 多久上课 2026-03-27 12/600 2026-03-30 21:21 by 研究僧导导
[考研] 一志愿:西北大学,英一数一408-284分求调剂 +5 12.27 2026-03-27 5/250 2026-03-30 19:31 by 源_2020
[考研] 289求调剂 +16 新时代材料 2026-03-27 16/800 2026-03-30 19:04 by Wang200018
[考研] 求调剂323材料与化工 +10 1124361 2026-03-24 10/500 2026-03-30 16:26 by 690616278
[考研] 318一志愿吉林大学生物与医药 求调剂 +5 笃行致远. 2026-03-28 5/250 2026-03-30 06:56 by ilovexiaobin
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-29 20:21 by dophin1985
[考研] 总分293求调剂 +8 加一一九 2026-03-25 11/550 2026-03-29 19:53 by 无际的草原
[考研] 340求调剂 +6 Amber00 2026-03-26 6/300 2026-03-29 12:06 by 无际的草原
[考研] 086000生物与医药调剂 +5 Feisty。 2026-03-28 9/450 2026-03-29 12:02 by longlotian
[考研] 调剂考研 +3 王杰一 2026-03-29 3/150 2026-03-29 08:09 by fmesaito
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 0703化学求调剂,各位老师看看我!!! +5 祁祺祺 2026-03-25 5/250 2026-03-27 21:44 by 东方猪猪
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪!?!
信息提示
请填处理意见