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素素2008

新虫 (初入文坛)

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[求助] 提取DNA出现弥散------求助

Sample TextSample Text求助：
小虫做海洋藻类的DNA提取。虽然有条带，但是有很长的弥散拖带，求助：这是什么原因？因为DNA浓度很低，只有20ng/ml,所以模板量加的比较多。有4ul。用mix做的。引物为2ul。

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附件 1 : Administrator2012-11-2709小时49分钟.jpg

2012-11-27 11:17:55, 162.77 K

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1楼 2012-11-27 11:21:19

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素素2008

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引用回帖:

9楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-28 07:57:46
RNase的量应该是可以的，可能是消化不很充分吧。不知道你是从多少藻里提出的这个样品。至于提的量少，最有可能的原因还是最初细胞破碎不完全。不知道你是用什么方法裂解细胞的。你如果只是要用这个DNA做PCR是可以的 ...

我做的是真核藻，我没有专门破碎细胞的步骤，只是加了些CTAB裂解液温育。老师说，这就算是破碎细胞的过程了。还说藻细胞很容易破裂的。请问虫友，你用的什么方法破碎的？我们是初做，一直在摸索，但效果很不好，不知道是不是破裂细胞这步出了问题。求教！我只是用它做PCR,但是一直做不出来了，成功率非常低，偶尔浓度达到50以上的，条带就很亮？求指教！