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qiuzhileipo

木虫 (正式写手)

生如夏花

[求助] DNA聚丙烯酰胺凝胶

哪位大侠,能不能帮下忙啊!非变性聚丙烯酰胺凝胶跑DNA电泳,指示剂一直在孔里?哪里出现问题了?
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傻子

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 鼓励分享经验 2012-11-28 13:56:33
qiuzhileipo: 回帖置顶 2012-11-30 13:31:07
非变性的PAGE,DNA不用变性,使用6 X loading buffer就可以了。
实验中除了需要按方法做外,注意几点:
1. 电源接通后,观察是否有气泡产生,判断是否通电开始电泳
2. 凝胶过程中,需将胶充分混匀后加入胶版中,并保证足够的凝胶时间
3. 指示剂在胶孔中,不知你是否做过银染看DNA是否迁移下来
4. 电泳前,需将胶孔中未凝集的胶吹出
1984年中国制造,长173CM,净重64kg,采用人工智能,国家免检优质产品。
12楼2012-11-28 12:38:28
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
(1)pH不对,我是用TBE buffer,
  (2)  胶的比例不对
(3) 电源问题?
行至水穷处,坐看云起时
2楼2012-11-27 12:34:22
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的指示剂里面是些什么东西?
低调稳重务实内敛---------------残
3楼2012-11-27 13:01:54
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CXL19880406

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
指示剂是什么呢?是marker么?如果是marker的话没加变性buffer吧,另外注意变性buffer的配方,祝实验成功~
4楼2012-11-27 13:51:04
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