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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 其他 » 用pH6.5缓冲液和PVPP提取多酚氧化酶，测酶活的时候为什么吸光度随时间逐渐降低呢
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丹朱GOGO

铜虫 (初入文坛)

[求助] 用pH6.5缓冲液和PVPP提取多酚氧化酶，测酶活的时候为什么吸光度随时间逐渐降低呢

用pH6.5缓冲液和PVPP提取苹果中的多酚氧化酶，离心后的液体是橙黄色的，测酶活的时候为什么吸光度随时间逐渐降低呢？望有识之士能帮忙解答下！多谢多谢！
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1楼2012-11-23 14:38:36
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slj176

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
丹朱GOGO: 金币+1 2012-12-05 17:18:05
引用回帖:
6楼: Originally posted by 丹朱GOGO at 2012-11-26 15:08:40
根据文献，酶、底物、缓冲液各加了1mL，缓冲液pH6.5，我增加离心速度试试...

一般需要更换三种溶液的配比
赞一下 回复此楼
像格瓦拉一样，越是困难越是第一个上！
8楼2012-11-26 16:14:26
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zhouxj

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
丹朱GOGO: 金币+1 2012-12-05 17:17:19
生成的物质是不是不稳定了，超过一定时间就是减少的，减少测定时间，重新设置进程曲线的线性范围
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2楼2012-11-23 23:53:02
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slj176

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
丹朱GOGO: 金币+1 2012-12-05 17:17:33
一般有一下几个原因：a、底物或者酶量不足，可以调整底物或者酶的添加量。
                    b、温度和或者缓冲液pH值非最佳。
                    c、其他物质干扰，建议增加离心速度。
希望能帮到你！
赞一下(2人) 回复此楼

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丹朱GOGO
像格瓦拉一样，越是困难越是第一个上！
3楼2012-11-24 13:42:29
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louise1988

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
丹朱GOGO: 金币+1 2012-12-05 17:17:44
测酶活的时候，之前操作有没有在冰上进行啊？可能是部分酶失活了噢……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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为实验献身了我！！！
4楼2012-11-25 09:50:44
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