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340271018

银虫 (小有名气)

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虫号: 1425411
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专业: 药理学其他科学问题

[求助] 蒸发光检测器测磷脂，色谱峰过宽是怎么回事呢?

用的是蒸发光检测器，测磷脂时（avanti买的以此为标准品），在5min-15min时有一个很宽的峰，基线相对还算平稳，流动相为氯仿-甲醇-氨水=80:20:0.25 有试过将甲醇和氨水的比例互换但效果不明显。

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1楼 2012-11-22 10:53:18

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药健康

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 1885447
注册: 2012-07-09
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专业: 药理学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
340271018: 金币+15, ★★★★★最佳答案 2013-01-24 22:26:09

出现宽峰的原因有以下几方面：1·流动相流速太低             解决方法：调节流速
                                       2·柱外效应影响，柱子过载    解决方法: (1)小体积进样（2）以1：10或1：100的比例稀释样品
                                       3·柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大解决方法：使用内径为0.007~0.01的管路，用短管路
                                       4·缓冲液浓度太低          解决方法：增加浓度
                                       5·保护柱污染或失效       解决方法：更换保护
                                       6.色谱柱污染或柱效降低解决方法：(1)更换色谱柱(2)用强溶剂冲洗旧柱子
                                       7.柱入口塌陷                解决方法：填补塌陷活更换柱子
                                       8.柱温过低                   解决方法：提高柱温，但温度不宜超过70摄氏度
                                       9.检测器时间常数太大    解决方法;  使用较小的时间常数
以上原因分析仅供参考。谢谢！长沙希尔药物研究有限公司。