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340271018

银虫 (小有名气)

[求助] 蒸发光检测器测磷脂,色谱峰过宽是怎么回事呢?

用的是蒸发光检测器,测磷脂时(avanti买的以此为标准品),在5min-15min时有一个很宽的峰,基线相对还算平稳,流动相为氯仿-甲醇-氨水=80:20:0.25  有试过将甲醇和氨水的比例互换但效果不明显。
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药健康

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
340271018: 金币+15, ★★★★★最佳答案 2013-01-24 22:26:09
出现宽峰的原因有以下几方面:1·流动相流速太低               解决方法:调节流速
                                          2·柱外效应影响,柱子过载      解决方法: (1)小体积进样 (2)以1:10或1:100的比例稀释样品
                                          3·柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大   解决方法:使用内径为0.007~0.01的管路,用短管路
                                          4·缓冲液浓度太低            解决方法:增加浓度  
                                          5·保护柱污染或失效         解决方法:更换保护
                                          6.色谱柱污染或柱效降低   解决方法:(1)更换色谱柱(2)用强溶剂冲洗旧柱子
                                          7.柱入口塌陷                  解决方法:填补塌陷活更换柱子
                                          8.柱温过低                     解决方法:提高柱温,但温度不宜超过70摄氏度
                                          9.检测器时间常数太大      解决方法;  使用较小的时间常数
以上原因分析仅供参考。谢谢!长沙希尔药物研究有限公司。
让生命更精彩
10楼2013-01-16 13:54:54
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古可ぷ

荣誉版主 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
340271018: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-03 22:34:44
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-13 12:17:27
色谱柱过载,降低进样量试试看
非吾小天下,才高而已;非吾纵古今,时赋而已;非吾睨九州,宏观而已;三非焉罪?无梦至胜
2楼2012-12-02 19:34:01
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340271018

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 古可ぷ at 2012-12-02 19:34:01
色谱柱过载,降低进样量试试看

我的进样量也就20ug/ml这样还高吗?那要大概多少呢
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3楼2012-12-02 21:45:17
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古可ぷ

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xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-13 12:17:31
引用回帖:
3楼: Originally posted by 340271018 at 2012-12-02 21:45:17
我的进样量也就20ug/ml这样还高吗?那要大概多少呢...

先降低进样量看看
也有可能是其他情况
比如你进样量是20ul可以降低到10ul看看,如果不行就是其他情况
非吾小天下,才高而已;非吾纵古今,时赋而已;非吾睨九州,宏观而已;三非焉罪?无梦至胜
4楼2012-12-02 22:10:14
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