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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 想把pET30a的kana抗性基因转入pUC19，p出来连进去就行么？
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wy135033405

木虫 (小有名气)

[求助] 想把pET30a的kana抗性基因转入pUC19，p出来连进去就行么？

如题，pET-30a的kana抗性基因位于4048-4860，那么为了转入pUC19，是否PCR获得两端带有pUC19的多克隆位点所包含的酶切位点的基因序列（位点1---4048-4860---位点2），酶切与pUC19连接就可以呢？kana基因之前是否还有promoter等调控元件？是否需要考虑？
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1楼 2012-11-19 10:32:52
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ducktk

金虫 (初入文坛)
我之前将pCola-duet载体上的kana基因片段P下来连到其他载体上，可以表达。
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9楼2012-12-23 10:49:00
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wy135033405: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-19 14:25:27
要考虑kana基因ORF两端的promoter和转录终止序列
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2012-11-19 12:26:39
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shsDerek

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wy135033405: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-11-19 14:25:46
可能不行，需要考虑前后序列，不然转入的基因起不到作用
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3楼2012-11-19 12:42:31
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wy135033405

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by shsDerek at 2012-11-19 12:42:31
可能不行，需要考虑前后序列，不然转入的基因起不到作用

谢谢，请问您是指读码框需要确定还是kana的调控序列？
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4楼2012-11-19 14:23:12
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