应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 扩增基因CDS区域如何设计引物？
373/4返回列表上一页1234下一页
查看: 9314  |  回复: 36
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
19楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-25 19:26:51
哥们。。。你看一下PCR的原理就知道啦。。上游引物就是你的目的基因前面那17到25啦（不是互补）。下游引物即是与你的目的基因末端反向互补的序列啦。Genebank和FAST格式不都是一样的吗？哥们。。。你真的好好看一下 ...

加酶切位点时红色字体是必须有的，其余的前后很色字体碱基是为了调节GC含量的吗？primer-- blast验证时只输入未加酶切位点的原始引物吗？多谢啦！
赞一下 回复此楼
21楼2012-11-25 22:33:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
yuguiyan: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2012-11-28 19:55:34
引用回帖:
21楼: Originally posted by yuguiyan at 2012-11-25 22:33:12
加酶切位点时红色字体是必须有的，其余的前后很色字体碱基是为了调节GC含量的吗？primer-- blast验证时只输入未加酶切位点的原始引物吗？多谢啦！...

加酶切位点一般你就加在5'端就行啦。。。对的。。Primer-blast验证时只输入未加酶切位点的就行。。。
赞一下 回复此楼
keepon
22楼2012-11-26 09:30:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

找到序列，找公司帮你基因合成吧
赞一下 回复此楼
23楼2012-11-26 10:00:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
23楼: Originally posted by gongeleven at 2012-11-26 10:00:44
找到序列，找公司帮你基因合成吧

那我还有必要在这问大家吗？
赞一下 回复此楼
24楼2012-11-26 19:04:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lvanmorison at 2012-11-22 23:02:02
你是在基因组里面PCR，还是用mRNA来PCR啊？
应该是在基因的CDS序列的前后各设计一个引物，就好了吧。
我也在做这个呢

欲连接真核表达载体，设计引物时有什么药特别注意的呢？
赞一下 回复此楼
25楼2012-11-26 21:02:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
22楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-26 09:30:47
加酶切位点一般你就加在5'端就行啦。。。对的。。Primer-blast验证时只输入未加酶切位点的就行。。。...

有人说连接完T载体后可以只做菌液PCR无需双酶切即可验证，是这样的吗？
赞一下 回复此楼
26楼2012-11-26 22:15:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
26楼: Originally posted by yuguiyan at 2012-11-26 22:15:08
有人说连接完T载体后可以只做菌液PCR无需双酶切即可验证，是这样的吗？...

菌液PCR，PCR产物去测序，双酶切验证无意义
赞一下 回复此楼
27楼2012-11-27 09:04:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
yuguiyan: 金币+1 2012-11-28 19:55:57
引用回帖:
25楼: Originally posted by yuguiyan at 2012-11-26 21:02:54
欲连接真核表达载体，设计引物时有什么药特别注意的呢？...

ATG前面带个GCCACC
赞一下 回复此楼
28楼2012-11-27 09:05:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
28楼: Originally posted by gongeleven at 2012-11-27 09:05:08
ATG前面带个GCCACC...

ATG前面带个GCCACC

是什么原理啊？
赞一下 回复此楼
29楼2012-11-27 20:24:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
yuguiyan: 金币+1 2012-11-28 19:56:15
引用回帖:
29楼: Originally posted by yuguiyan at 2012-11-27 20:24:27
ATG前面带个GCCACC

是什么原理啊？...

潜在的提高表达，详情请搜索kozak序列
赞一下 回复此楼
30楼2012-11-28 09:07:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuguiyan 的主题更新
373/4返回列表上一页1234下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:50 by jCd0dEvKHShX
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-29 11:39 by jCd0dEvKHShX
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:29 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +14 晴天加油 2026-08-26 15/750 2026-08-29 11:06 by biily
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 9/450 2026-08-29 09:59 by jklily
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 09:26 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭