19楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-25 19:26:51
哥们。。。你看一下PCR的原理就知道啦。。上游引物就是你的目的基因前面那17到25啦（不是互补）。下游引物即是与你的目的基因末端反向互补的序列啦。Genebank和FAST格式不都是一样的吗？哥们。。。你真的好好看一下 ...

21楼: Originally posted by yuguiyan at 2012-11-25 22:33:12
加酶切位点时红色字体是必须有的，其余的前后很色字体碱基是为了调节GC含量的吗？primer-- blast验证时只输入未加酶切位点的原始引物吗？多谢啦！...

23楼: Originally posted by gongeleven at 2012-11-26 10:00:44
找到序列，找公司帮你基因合成吧

6楼: Originally posted by lvanmorison at 2012-11-22 23:02:02
你是在基因组里面PCR，还是用mRNA来PCR啊？
应该是在基因的CDS序列的前后各设计一个引物，就好了吧。
我也在做这个呢

22楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-26 09:30:47
加酶切位点一般你就加在5'端就行啦。。。对的。。Primer-blast验证时只输入未加酶切位点的就行。。。...

26楼: Originally posted by yuguiyan at 2012-11-26 22:15:08
有人说连接完T载体后可以只做菌液PCR无需双酶切即可验证，是这样的吗？...

25楼: Originally posted by yuguiyan at 2012-11-26 21:02:54
欲连接真核表达载体，设计引物时有什么药特别注意的呢？...

28楼: Originally posted by gongeleven at 2012-11-27 09:05:08
ATG前面带个GCCACC...

29楼: Originally posted by yuguiyan at 2012-11-27 20:24:27
ATG前面带个GCCACC

是什么原理啊？...