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细胞染色问题 求教大师
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山落天外
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细胞染色问题 求教大师
现在想做药物的细胞内吞实验,需要对细胞核和溶酶体染色 ,买的染液分别是Hoechst 33342 和 Lysotracker Green DND-26 但不知道二者染色顺序是怎样的?
急切期望有经验的高手能够指点相关细节
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1楼
2012-11-18 09:04:23
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山落天外
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2楼
:
Originally posted by
wangmingyue
at 2012-11-20 12:30:45
Lysotracker 先染,一般是在实验设计的时间比如2h到了之后,吸去培养液,换成含有Lysotracker 的培养液(使用说明中会有稀释倍数和孵育时间)。然后取出,PBS洗,固定,染核。
非常感谢 也就是说 染溶酶体---固定---再染细胞核这个顺序了??
还想请教一个问题是有文献说染溶酶体时需要 含Lysotracker 的培养液不含FBS牛血清蛋白 如果是这样的话具体该怎么操作呢?
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3楼
2012-11-20 17:05:52
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wangmingyue
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2012-11-20 17:06:16
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助
2012-11-20 17:08:36
Lysotracker 先染,一般是在实验设计的时间比如2h到了之后,吸去培养液,换成含有Lysotracker 的培养液(使用说明中会有稀释倍数和孵育时间)。然后取出,PBS洗,固定,染核。
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2楼
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把原来加药的培养液吸去,用不含血清的培养液或者PBS洗一遍到两遍。Lysotracker同样用不含血清的培养液稀释后加到细胞培养容器内。
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4楼
2012-11-20 19:07:52
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4楼
:
Originally posted by
wangmingyue
at 2012-11-20 19:07:52
把原来加药的培养液吸去,用不含血清的培养液或者PBS洗一遍到两遍。Lysotracker同样用不含血清的培养液稀释后加到细胞培养容器内。
再次表示感谢
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5楼
2012-11-20 21:38:00
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