24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1874  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yuminzorro

木虫 (小有名气)

[求助] 一个平板上挑取不同菌落得到的测序结果不一样

做克隆测序时,我将PCR产物切胶回收,连接转化到感受态细胞中,进行蓝白斑筛选后,一个平板上挑去3个单克隆,菌液PCR结果显示是阳性克隆,然后将菌液送去测序,但测序结果3个中只有一个是我的目的序列。求高手帮助解释一下!谢谢!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

测序相关问题

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shen_41745

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
yuminzorro: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-11-14 19:56:23
一是你用于扩展PCR的酶是高保真酶吗?二即使出现假阳性克隆也很正常啊,只要有正确的出来就行啦!
9楼2012-11-14 16:02:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

xj0311

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yuminzorro: 金币+2 2012-11-14 19:56:32
蓝白斑筛选经常会出现这样的情况,如果有酶切位点建议测序之前自己可以鉴定一下
3楼2012-11-14 14:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yuminzorro: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-11-14 19:56:39
你如何确定自己的是阳性?PCR?这个不可信,没有酶切吧?
只有酶切正确的才是阳性,不然就会出现你这种情况,很明显,你送去测序的菌株里面有两个都是假阳性.
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
4楼2012-11-14 14:54:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuminzorro

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Marado at 2012-11-14 14:54:26
你如何确定自己的是阳性?PCR?这个不可信,没有酶切吧?
只有酶切正确的才是阳性,不然就会出现你这种情况,很明显,你送去测序的菌株里面有两个都是假阳性.

我没有进行酶切鉴定,直接对菌液进行扩增,电泳显示条带大小和我的目的产物大小一致啊。这样鉴定不行吗/
5楼2012-11-14 15:21:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 药学求调剂 +7 RussHu 2026-04-12 8/400 2026-04-15 08:33 by zs92450
[考研] 367求调剂 +11 hffQAQ 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:48 by lhj2009
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +6 喽哈加油 2026-04-13 6/300 2026-04-14 16:40 by zhouxiaoyu
[考研] 297,工科调剂? +6 河南农业大学-能 2026-04-14 6/300 2026-04-14 16:04 by Art1977
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 一志愿哈工大 085600 277 12材科基求调剂 5+5 chenny174 2026-04-10 37/1850 2026-04-14 07:39 by Abskk
[考研] 求调剂,985材料与化工348分 +9 涵竹刘 2026-04-11 14/700 2026-04-13 22:26 by 涵竹刘
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +9 求上岸的小王 2026-04-10 9/450 2026-04-13 16:08 by jiangguiquan11
[考研] 材料复试求调剂 +24 xhhdjdjsjks 2026-04-09 24/1200 2026-04-13 15:49 by 幸免 ..
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 一志愿华工085600 331分 +7 天下ww 2026-04-09 7/350 2026-04-13 09:01 by lhj2009
[考研] 346分,工科0854求调剂,专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-08 9/450 2026-04-12 02:24 by 秋豆菜芽
[考研] 药学专硕调剂 +8 ? 一路生?花? 2026-04-10 10/500 2026-04-11 21:21 by zhouxiaoyu
[考研] 本人女孩 +7 吼吼, 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 0854调剂 +4 长弓傲 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:18 by 猪会飞
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 332,085601求调剂 +12 ydfyh 2026-04-09 14/700 2026-04-09 17:28 by wp06
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
信息提示
请填处理意见