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曾经遥远

银虫 (正式写手)

[求助] 培养农杆菌EHA菌株,用利福平和卡那霉素培养的依据是什么?

突然想到这个问题,培养农杆菌EHA菌株,用利福平和卡那霉素培养的依据是什么?查资料也只是一知半解,还请大侠们指点指点!
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天空2011

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
曾经遥远: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢哈 2012-11-15 00:42:11
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-19 13:39:46
EHA本身应该含有利福平抗性,你转进去的载体上含有kana抗性,转化成功的话,就应该含有这两种抗性。你问一下你的菌株含有什么质粒,那上面应该有kana抗性基因,所以用这两种抗生素培养,避免其他杂菌的污染。
4楼2012-11-14 17:16:23
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vcvcvc

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
曾经遥远: 金币+1, 有帮助, 能说具体些么?偶悟性比较差哈 2012-11-15 00:42:52
曾经遥远: 金币+2 2012-11-16 10:46:47
Rif for Ti vector
Kana for binary vector,

if you mean it
3楼2012-11-14 14:35:06
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普通回帖

chen__shuang

金虫 (知名作家)

不会,不过顶一下还是没问题的
看陌生的风景,邂逅陌生的人。很幸运,以后的路上有你。
2楼2012-11-14 13:51:09
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曾经遥远

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chen__shuang at 2012-11-14 13:51:09
不会,不过顶一下还是没问题的

5楼2012-11-15 00:38:06
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曾经遥远

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 天空2011 at 2012-11-14 17:16:23
EHA本身应该含有利福平抗性,你转进去的载体上含有kana抗性,转化成功的话,就应该含有这两种抗性。你问一下你的菌株含有什么质粒,那上面应该有kana抗性基因,所以用这两种抗生素培养,避免其他杂菌的污染。

质粒是植物双元表达载体PBI121,是有kana抗性基因。
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6楼2012-11-15 00:41:57
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曾经遥远

银虫 (正式写手)

自己顶一下
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7楼2012-11-15 13:06:59
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天空2011

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 曾经遥远 at 2012-11-15 00:41:57
质粒是植物双元表达载体PBI121,是有kana抗性基因。...

8楼2012-11-16 10:42:12
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haiyanli1988

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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曾经遥远: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢哈 2012-11-17 20:00:59
农杆菌EHA菌株里面有辅助质粒的,可能你的辅助质粒是利福平抗性,kan是用来筛选双元载体克隆转化后的转化子,不知道对不对,你看看吧。
9楼2012-11-16 11:03:22
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十比

木虫 (著名写手)

曾经遥远: 回帖置顶 2012-11-18 17:11:30
不同的农杆菌菌株的抗性是不一样的,kan肯定是你自己转入载体的抗性,rif是农杆菌本身的抗性。
在网上找找这篇文章看看就懂了。A guide to agrobacterium binary Ti vectors
10楼2012-11-18 11:00:21
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