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xubang123

金虫 (小有名气)

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[交流] 色谱柱过载，另类解决办法，有经验的进来一起探讨下……

最近做了一个比较特别的项目，和大家探讨下：
分析物特点：1）极性大，在色谱柱中特难保留，2）分子量小， 3）信号响应低
所以好不容易开发了个方法，却发LCMS现响应不够高，进样量从5ul加到10ul色谱柱过载，峰型分叉，信号降低，后来无意中，由中性流动性换成碱性流动性，发现即使进样量达到20ul，峰型也很漂亮，信号也很好。
那么在这里色谱柱过载是什么原因造成的，为什么换成碱性的没问题了？
求高手来探讨下……

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1楼 2012-11-10 22:09:09

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xubang123

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

8楼: Originally posted by songzi136 at 2012-11-17 23:00:54
你所分析的物质应该是酸性的，或是碱性的。酸性物质在碱性溶液中主要以离子状态存在，而在中性溶液中同时以分子和离子状态存在，所以会存在拖尾等现象（可能是因为两种状态在色谱柱上的保留有差异）；若是碱性物质 ...

谢谢您的回答，这些天查阅一些资料，以下解释和您说的比较接近，也比较让人信服。
化合物在反相条件下呈电中性时，上样量可以增加20-80倍。
这可以解释PH变化，进样量增加，峰形更好。
但在中性下进样20ul,出现前沿和拖尾，这怎么解释，这会不会是因为溶剂效应导致的，如果是，那么在碱性条件下为什么溶剂效应消失了？