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xubang123

金虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 2379.9
帖子: 152
在线: 71.3小时
虫号: 803089

[交流] 色谱柱过载，另类解决办法，有经验的进来一起探讨下……

最近做了一个比较特别的项目，和大家探讨下：
分析物特点：1）极性大，在色谱柱中特难保留，2）分子量小， 3）信号响应低
所以好不容易开发了个方法，却发LCMS现响应不够高，进样量从5ul加到10ul色谱柱过载，峰型分叉，信号降低，后来无意中，由中性流动性换成碱性流动性，发现即使进样量达到20ul，峰型也很漂亮，信号也很好。
那么在这里色谱柱过载是什么原因造成的，为什么换成碱性的没问题了？
求高手来探讨下……

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1楼 2012-11-10 22:09:09

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songzi136

金虫 (正式写手)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 1946.7
帖子: 427
在线: 177.1小时
虫号: 516045

引用回帖:

7楼: Originally posted by xubang123 at 2012-11-17 08:59:11
你说得对，这化合物极性很大，不容易保留，化合物中有机相稍微多些，就会出现前沿拖尾的峰，如果用有机相复溶，确实保留会好些，峰型也不错，这样现象应该是溶剂效应。但有一点不是很明白，后来换了碱性流动性，其 ...

你所分析的物质应该是酸性的，或是碱性的。酸性物质在碱性溶液中主要以离子状态存在，而在中性溶液中同时以分子和离子状态存在，所以会存在拖尾等现象（可能是因为两种状态在色谱柱上的保留有差异）；若是碱性物质在碱性溶液中主要是分子状态存在。所以大多数流动相都是酸性的或是碱性的。