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caidongjie

银虫 (初入文坛)

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[交流] 外源基因连接载体

请教各位大侠：为什么我连接以后的重组载体质粒PCR有目的条带，但是酶切后什么条带都没有，质粒跑电泳也没有条带，做PCR时用的是一个重组质粒，我的酶切位点是Hind3和Xba1，表达载体是pMG36e。。。。。求助各位大侠们。。。。。

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1楼 2012-11-09 17:29:14

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caidongjie

银虫 (初入文坛)

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引用回帖:

13楼: Originally posted by liuan6126 at 2012-11-13 13:57:27
这个5 ml也不大好讲，毕竟OD600可能不同，现在你PCR出来，但质粒酶切没条带，估计你提完质粒没跑电泳看看浓度。
建议：菌体量大点，提完质粒3 ul电泳看看浓度。PS：冬天有些时候质粒提不出来，建议第二步裂解在37 ...

恩恩，十分感谢，我再试试看，不行就得重头做了，脑袋都大了