24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3793)
>虫友互识 (886)
>论文投稿 (268)
>休闲灌水 (229)
>导师招生 (169)
>基金申请 (149)
>文献求助 (147)
>硕博家园 (99)
>考博 (78)
>博后之家 (72)
>公派出国 (72)
>教师之家 (61)
>考研 (58)
>论文道贺祈福 (41)
>招聘信息布告栏 (39)
>找工作 (35)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

caidongjie

银虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 325.1
帖子: 36
在线: 12小时
虫号: 1441368

[交流] 外源基因连接载体

请教各位大侠：为什么我连接以后的重组载体质粒PCR有目的条带，但是酶切后什么条带都没有，质粒跑电泳也没有条带，做PCR时用的是一个重组质粒，我的酶切位点是Hind3和Xba1，表达载体是pMG36e。。。。。求助各位大侠们。。。。。

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

分子生物学常用实验已经有128人回复
如何对动物细胞中外源表达基因转录的mRNA进行测序已经有4人回复
如果一个外源基因对细菌有毒性，如何构建过表达载体/回补载体已经有2人回复
α-淀粉酶基因表达问题已经有7人回复
细菌基因组文库构建的相关问题已经有23人回复
（侯氏出品）双酶切连接反应之全攻略已经有89人回复
基因工程课程小结已经有20人回复
[size=5]外源基因原核表达遭遇种种瓶颈，求各位高手近来解答[/size] 已经有13人回复
【资料】分子生物学常见问题解答已经有30人回复
【资料】细胞分子生物技术方法与步骤详解已经有387人回复
【求助/交流】急！关于外源基因在丝状真菌中的融合表达已经有8人回复
【求助/交流】枯草芽孢杆菌rpsD启动子在枯草中表达外源基因的功能已经有0人回复
【求助/交流】酿酒酵母真核表达载体构建和连接的问题已经有6人回复
生物学软件介绍及其下载地址【学生物的会很有用】已经有24人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2012-11-09 17:29:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

caidongjie

银虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 325.1
帖子: 36
在线: 12小时
虫号: 1441368

引用回帖:

13楼: Originally posted by liuan6126 at 2012-11-13 13:57:27
这个5 ml也不大好讲，毕竟OD600可能不同，现在你PCR出来，但质粒酶切没条带，估计你提完质粒没跑电泳看看浓度。
建议：菌体量大点，提完质粒3 ul电泳看看浓度。PS：冬天有些时候质粒提不出来，建议第二步裂解在37 ...

恩恩，十分感谢，我再试试看，不行就得重头做了，脑袋都大了