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外源基因连接载体
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caidongjie
银虫
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[交流]
外源基因连接载体
请教各位大侠:为什么我连接以后的重组载体质粒PCR有目的条带,但是酶切后什么条带都没有,质粒跑电泳也没有条带,做PCR时用的是一个重组质粒,我的酶切位点是Hind3和Xba1,表达载体是pMG36e。。。。。求助各位大侠们。。。。。
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1楼
2012-11-09 17:29:14
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caidongjie
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10楼
:
Originally posted by
apple6299
at 2012-11-12 19:07:13
PCR会存在假阳性的现象,一般不太可靠。最好的方法就是,先提取质粒,电泳,看下大小是否是正确的,大小正确之后,选择合适位点进行酶切验证,酶切后得到的片段大小与预测大小正确后,最好送去测序公司测下序,从而 ...
谢谢您!我提质粒跑电泳没有条带啊,酶切的时候什么条带都没有,是质粒浓度低吗?
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12楼
2012-11-12 20:45:39
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竹子小小
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★
caidongjie(金币+5): 谢谢参与
质粒跑电泳都没有带那就是你质粒没提出来
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caidongjie
2楼
2012-11-09 17:44:54
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liuan6126
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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
质粒的浓度太低了,重新提,菌体量大点
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caidongjie
7楼
2012-11-11 11:22:28
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caidongjie
银虫
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2楼
:
Originally posted by
竹子小小
at 2012-11-09 17:44:54
质粒跑电泳都没有带那就是你质粒没提出来
谢谢,我用8微升的质粒跑的电泳,可能浓度太低了,PCR只用2微升但是条带很亮,郁闷
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8楼
2012-11-11 18:54:56
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