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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于乳酸菌的培养
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巴山夜雨YJ

银虫 (小有名气)

[交流] 关于乳酸菌的培养

乳酸菌加入摇瓶后，通过摇床24h后开始测OD值，OD值测得大于1，需要稀释，应该是用怎样的方法进行稀释，这些都要超净台中操作吗？
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1楼 2012-11-07 19:35:02
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-08 17:30:05
巴山夜雨YJ: 金币+2 2012-11-08 18:43:28
看你是怎么操作
如果不进行后续培养，直接在超净台外操作就行；如果要培养，那就不行了，必须在超净台内进行

关于稀释方法，目前只是一些经验方法。我是采用蒸馏水进行的，而且尽量设计一个好的稀释度，保证所有样品都在同一个稀释度，这样才有可比性，不然，不同的稀释度出来的结果就没法看了
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2楼2012-11-08 08:51:47
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巴山夜雨YJ

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-11-08 05:51:47
看你是怎么操作
如果不进行后续培养，直接在超净台外操作就行；如果要培养，那就不行了，必须在超净台内进行

关于稀释方法，目前只是一些经验方法。我是采用蒸馏水进行的，而且尽量设计一个好的稀释度，保证所有 ...

了解~~那不进行后续培养的话，那些菌液按常规来说是怎么处理的呢？
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3楼2012-11-08 18:43:10
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
巴山夜雨YJ: 金币+1 2012-11-10 10:23:52
引用回帖:
3楼: Originally posted by 巴山夜雨YJ at 2012-11-08 18:43:10
了解~~那不进行后续培养的话，那些菌液按常规来说是怎么处理的呢？...

那就在无菌台外也可以采用稀释的方法进行呀

取1ml菌悬液+3ml蒸馏水，吹打均匀测OD就行了
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4楼2012-11-09 08:33:39
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巴山夜雨YJ

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-11-09 05:33:39
那就在无菌台外也可以采用稀释的方法进行呀

取1ml菌悬液+3ml蒸馏水，吹打均匀测OD就行了...

我是说那些菌液不需要用了，要处理掉，是直接倒水槽还是有别的方法，还有固体培养基~~

我之前讲得不清楚，不好意思啦~我刚刚接触微生物这一块，还有很多细节的地方不明白，多谢指教啦~
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5楼2012-11-10 10:23:37
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wzglnts

木虫 (小有名气)
直接倒掉就OK！
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6楼2012-11-10 13:42:31
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wzglnts

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
巴山夜雨YJ: 金币+1 2012-11-10 17:44:30
稀释多少要根据现在菌液的浓度，分光光度计在样品OD为0.2-0.7间最准，所以试着将菌液稀释到所测OD为0.2-0.7之间，然后乘以稀释倍数，就是菌液OD值，另外测OD时，波长要调到你所测乳酸菌的波长，一般600nm，至于不用的菌液直接倒水槽。。。
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7楼2012-11-10 13:47:42
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wgy2007

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
巴山夜雨YJ: 金币+1 2012-11-10 17:44:36
不用的菌液最好加热煮沸后倒掉或在灭菌锅内灭菌后倒掉，或加入一定量的消毒液处理使菌灭活后倒掉，尽量不要活菌排放，一容易污染环境，二是环境中的活菌量多了会染噬菌体，给你以后的实验带来麻烦。
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8楼2012-11-10 16:10:09
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 巴山夜雨YJ at 2012-11-10 10:23:37
我是说那些菌液不需要用了，要处理掉，是直接倒水槽还是有别的方法，还有固体培养基~~

我之前讲得不清楚，不好意思啦~我刚刚接触微生物这一块，还有很多细节的地方不明白，多谢指教啦~...

普通乳酸菌直接倒掉就可以了
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9楼2012-11-12 08:58:26
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巴山夜雨YJ

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-11-12 05:58:26
普通乳酸菌直接倒掉就可以了
...

了解了解~~灰常感谢~
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10楼2012-11-12 21:23:45
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wzq_ing

金虫 (正式写手)
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5楼: Originally posted by 巴山夜雨YJ at 2012-11-10 10:23:37
我是说那些菌液不需要用了，要处理掉，是直接倒水槽还是有别的方法，还有固体培养基~~

我之前讲得不清楚，不好意思啦~我刚刚接触微生物这一块，还有很多细节的地方不明白，多谢指教啦~...

直接倒掉？？？？没被骂吗？
实验室正规操作，用过的培养基集中一起，高压蒸汽灭菌后才能倒掉，
这不是有害微生物，直接倒还好，要是有害，致病的，那就麻烦了
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11楼2012-11-13 11:30:44
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)
★
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你用什么当参比就用什么来稀释呗……
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12楼2012-11-13 13:51:57
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巴山夜雨YJ

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-11-09 05:33:39
那就在无菌台外也可以采用稀释的方法进行呀

取1ml菌悬液+3ml蒸馏水，吹打均匀测OD就行了...

这是稀释至4倍吧，测得OD值再乘以4
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13楼2012-11-28 19:12:00
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晓镤镤

金虫 (正式写手)
★
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4楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-11-09 08:33:39
那就在无菌台外也可以采用稀释的方法进行呀

取1ml菌悬液+3ml蒸馏水，吹打均匀测OD就行了...

个人感觉是不是用无菌空白培养基进行稀释会更好一点？然后用空白培养基作为空白对照，测得的结果减去空白对照直接就可以得到较为准确的OD值，但是如果用蒸馏水进行稀释的话，该如何选择空白对照呢？
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14楼2013-11-19 13:30:24
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 巴山夜雨YJ at 2012-11-08 18:43:10
了解~~那不进行后续培养的话，那些菌液按常规来说是怎么处理的呢？...

真菌及致病菌等必须高压灭菌处理，然后倒掉；

非致病菌可以直接倒掉，比如乳酸杆菌类细菌
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15楼2013-11-19 16:17:35
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)
★
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引用回帖:
14楼: Originally posted by 晓镤镤 at 2013-11-19 13:30:24
个人感觉是不是用无菌空白培养基进行稀释会更好一点？然后用空白培养基作为空白对照，测得的结果减去空白对照直接就可以得到较为准确的OD值，但是如果用蒸馏水进行稀释的话，该如何选择空白对照呢？...

你的分析很正确，如果要求精确处理，当然用空白培养基稀释更好。这样就要求设计实验前就要预计配制培养基时就多预留培养基

如果只是比较相互之间的大小，没有必要太过精确的处理，直接用蒸馏水也可以达到目的。
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16楼2013-11-19 16:25:32
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