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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（ISSR）
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)

[交流] 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（ISSR）

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（百分之六的胶）教的凝固需要多长时间啊？我做的胶都2个多小时了还没凝固，请问怎么回事啊？急需！！！请各位高手给点见解。
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1楼 2012-11-06 20:27:21
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
APS最好是新鲜配制，也可以在配好后分装成，-20°C保存。固体药品如果受潮了就不能用了。
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13楼2012-11-07 14:35:57
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tupac225

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by yulanwu0524 at 2012-11-07 12:49:27
请问 APS和TEMED能出什么问题 啊？...

冻融次数过多会失效的呀，
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14楼2012-11-07 15:44:29
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xiong-y-x

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能是APS和TEMED量的问题 还有你的APS是不是现配现用的 那个每次称0.1g溶于1L灭菌水，不能过夜用的
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15楼2012-11-07 17:15:19
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chlorella409

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by yulanwu0524 at 2012-11-07 12:48:42
过硫酸铵确实是有点受潮，那是不是要重新换一下药品啊？...

受潮了就肯定不能用了哦，烘干后的效果也不能保证的
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22楼2012-11-08 08:34:51
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375521944

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般一个小时内就能凝固了，APS要现配现用，注意充分混匀
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32楼2012-11-09 22:30:18
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liuhonghoney

木虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
APS用一个月也没关系，你确定AP和TEMED的比例加对了嘛？不过时间太长的话换下AP,见光不好吧！
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44楼2012-11-12 23:25:34
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
yulanwu0524(金币+1): 谢谢参与
确定APS和TEMED的用量和质量都没问题吗？还有就是丙烯酰胺母液中丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺的比例是否正确？
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2楼2012-11-07 07:59:56
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chlorella409

木虫 (正式写手)
★
yulanwu0524(金币+1): 谢谢参与
过硫酸铵的问题大点，只要有点受潮就不能用。其他会不会是Tris的ＰＨ不对，环境温度也有影响，冬天比较难凝固
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3楼2012-11-07 08:29:56
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tupac225

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
主要是APS和TEMED的出问题了，aps要配好了，分装成1ml的，一次一管，TEMED应该没什么问题。
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4楼2012-11-07 08:31:15
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贝壳v下了

铜虫 (初入文坛)
多加点AP
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5楼2012-11-07 08:58:00
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张军90后

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-08 13:43:51
大多是APS的问题，它容易失效，我正常在4度的冰箱里放置7天就不用了。如果是冬天的话可能会凝固慢点，可以放置在37度烘箱中即可。
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6楼2012-11-07 11:35:49
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-07 07:59:56
确定APS和TEMED的用量和质量都没问题吗？还有就是丙烯酰胺母液中丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺的比例是否正确？

确定没有问题
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7楼2012-11-07 12:47:38
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chlorella409 at 2012-11-07 08:29:56
过硫酸铵的问题大点，只要有点受潮就不能用。其他会不会是Tris的ＰＨ不对，环境温度也有影响，冬天比较难凝固

过硫酸铵确实是有点受潮，那是不是要重新换一下药品啊？
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8楼2012-11-07 12:48:42
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by tupac225 at 2012-11-07 08:31:15
主要是APS和TEMED的出问题了，aps要配好了，分装成1ml的，一次一管，TEMED应该没什么问题。

请问 APS和TEMED能出什么问题 啊？
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9楼2012-11-07 12:49:27
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 贝壳v下了 at 2012-11-07 08:58:00
多加点AP

谢谢
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10楼2012-11-07 12:49:39
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 张军90后 at 2012-11-07 11:35:49
大多是APS的问题，它容易失效，我正常在4度的冰箱里放置7天就不用了。如果是冬天的话可能会凝固慢点，可以放置在37度烘箱中即可。

我的APS防止了差不多有一个月左右了  也是在4度 啊？冬天要放置在37度烘箱中吗？
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11楼2012-11-07 12:51:06
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-07 07:59:56
确定APS和TEMED的用量和质量都没问题吗？还有就是丙烯酰胺母液中丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺的比例是否正确？

没得问题
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12楼2012-11-07 12:51:48
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xudabin98

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我敢跟你打赌，肯定是你的APS出了问题，这个东西最好现配现用，一次配了最好分装，然后放-20度。PAGE胶10多分钟就凝固了，但是假如你想跑出非常漂亮的胶，最好让它凝固时间长一点
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16楼2012-11-07 18:16:23
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 张军90后 at 2012-11-07 11:35:49
大多是APS的问题，它容易失效，我正常在4度的冰箱里放置7天就不用了。如果是冬天的话可能会凝固慢点，可以放置在37度烘箱中即可。

没听说过啊啊
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17楼2012-11-07 19:16:34
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-07 14:35:57
APS最好是新鲜配制，也可以在配好后分装成，-20°C保存。固体药品如果受潮了就不能用了。

晓得啊
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18楼2012-11-07 19:17:33
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-07 14:35:57
APS最好是新鲜配制，也可以在配好后分装成，-20°C保存。固体药品如果受潮了就不能用了。

晓得啊
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19楼2012-11-07 19:19:27
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by xudabin98 at 2012-11-07 18:16:23
我敢跟你打赌，肯定是你的APS出了问题，这个东西最好现配现用，一次配了最好分装，然后放-20度。PAGE胶10多分钟就凝固了，但是假如你想跑出非常漂亮的胶，最好让它凝固时间长一点

是的
APS的量是有点出入
谢谢
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20楼2012-11-07 19:21:10
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chengjg

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
把胶扔了，重做一遍 哈哈
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21楼2012-11-07 19:40:49
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charlen520

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
过不过夜用没有多大问题，我用的都是好多天前配好的，是不是你的胶没有混匀你就灌胶了？
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23楼2012-11-08 10:46:53
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
21楼: Originally posted by chengjg at 2012-11-07 19:40:49
把胶扔了，重做一遍 哈哈

亲 怎么这样啊
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24楼2012-11-08 17:56:39
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
22楼: Originally posted by chlorella409 at 2012-11-08 08:34:51
受潮了就肯定不能用了哦，烘干后的效果也不能保证的...

灰常感谢
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25楼2012-11-08 17:58:15
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希罗雅

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
主要是APS和TEMED的用量和质量都的问题   我做的是8%的  APS用300UL   TEMED是24.9UL
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26楼2012-11-08 21:06:06
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chengjg

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
24楼: Originally posted by yulanwu0524 at 2012-11-08 17:56:39
亲 怎么这样啊...

多加练习才能总结出经验 哈哈
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27楼2012-11-09 09:32:51
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wszjll

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by yulanwu0524 at 2012-11-07 12:49:39
谢谢

很简单，东西加错了，如果三十分钟之内还不凝固，肯定要重新再配，凝固时间太长是没用的。我的AP一次配10ml，放冰箱里每次都有用
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28楼2012-11-09 10:59:06
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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
90%是AP问题，我们实验室AP用了1/10,后来就失效了，你换别的实验室的AP试试。另外，当时AP出问题后，我们胶放时间长了会析出白色沉淀，你看看有没
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29楼2012-11-09 18:41:42
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-07 14:35:57
APS最好是新鲜配制，也可以在配好后分装成，-20°C保存。固体药品如果受潮了就不能用了。

谢谢提醒
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30楼2012-11-09 20:24:52
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 张军90后 at 2012-11-07 11:35:49
大多是APS的问题，它容易失效，我正常在4度的冰箱里放置7天就不用了。如果是冬天的话可能会凝固慢点，可以放置在37度烘箱中即可。

应该是过硫酸铵的问题大些
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31楼2012-11-09 20:25:35
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
28楼: Originally posted by wszjll at 2012-11-09 10:59:06
很简单，东西加错了，如果三十分钟之内还不凝固，肯定要重新再配，凝固时间太长是没用的。我的AP一次配10ml，放冰箱里每次都有用...

东西没错，是过硫酸铵有点受潮，可能失效了
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33楼2012-11-10 13:16:03
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
29楼: Originally posted by hxswdl at 2012-11-09 18:41:42
90%是AP问题，我们实验室AP用了1/10,后来就失效了，你换别的实验室的AP试试。另外，当时AP出问题后，我们胶放时间长了会析出白色沉淀，你看看有没

还是其他药品的问题大些  比如过硫酸铵
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34楼2012-11-10 13:16:49
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
26楼: Originally posted by 希罗雅 at 2012-11-08 21:06:06
主要是APS和TEMED的用量和质量都的问题   我做的是8%的  APS用300UL   TEMED是24.9UL

过硫酸铵的问题  可能失效
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35楼2012-11-10 13:18:07
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
21楼: Originally posted by chengjg at 2012-11-07 19:40:49
把胶扔了，重做一遍 哈哈

不能用  肯定得扔了
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36楼2012-11-10 13:21:03
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
23楼: Originally posted by charlen520 at 2012-11-08 10:46:53
过不过夜用没有多大问题，我用的都是好多天前配好的，是不是你的胶没有混匀你就灌胶了？

是药品问题吧
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37楼2012-11-10 13:21:52
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lemond

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
10%APS4°冰箱两周照用
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40楼2012-11-10 16:44:46
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
40楼: Originally posted by lemond at 2012-11-10 16:44:46
10%APS4°冰箱两周照用

晓得啊   是药品本身可能过期吧   谢谢
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41楼2012-11-11 21:26:29
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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
34楼: Originally posted by yulanwu0524 at 2012-11-10 13:16:49
还是其他药品的问题大些  比如过硫酸铵...

晕!我说的ap就是指过硫酸胺……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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42楼2012-11-12 08:01:07
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
42楼: Originally posted by hxswdl at 2012-11-12 08:01:07
晕!我说的ap就是指过硫酸胺……
...

嗯   晓得
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43楼2012-11-12 20:01:52
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hbbeijibing

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问各位高手，6%的变性聚丙烯酰胺胶配方是啥？
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45楼2012-11-27 13:51:08
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yulanwu052438楼
2012-11-10 13:22   回复  
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27楼: Originally posted by chengjg at 2012-11-09 09:32:51 多加练习才能总结出经验 哈哈...

yulanwu052439楼
2012-11-10 13:22   回复  
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28楼: Originally posted by wszjll at 2012-11-09 10:59:06 很简单，东西加错了，如果三十分钟之内还不凝固，肯定要重新再配，凝固时间太长是没用的。我的AP一次配10ml，放冰箱里每次都有用...

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