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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


[交流] 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(ISSR)

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(百分之六的胶)教的凝固需要多长时间啊?我做的胶都2个多小时了还没凝固,请问怎么回事啊?急需!!!请各位高手给点见解。
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
APS最好是新鲜配制,也可以在配好后分装成,-20°C保存。固体药品如果受潮了就不能用了。
13楼2012-11-07 14:35:57
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tupac225

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by yulanwu0524 at 2012-11-07 12:49:27
请问 APS和TEMED能出什么问题 啊?...

冻融次数过多会失效的呀,
14楼2012-11-07 15:44:29
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xiong-y-x

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能是APS和TEMED量的问题 还有你的APS是不是现配现用的 那个每次称0.1g溶于1L灭菌水,不能过夜用的
15楼2012-11-07 17:15:19
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chlorella409

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by yulanwu0524 at 2012-11-07 12:48:42
过硫酸铵确实是有点受潮,那是不是要重新换一下药品啊?...

受潮了就肯定不能用了哦,烘干后的效果也不能保证的
22楼2012-11-08 08:34:51
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375521944

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般一个小时内就能凝固了,APS要现配现用,注意充分混匀
32楼2012-11-09 22:30:18
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liuhonghoney

木虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
APS用一个月也没关系,你确定AP和TEMED的比例加对了嘛?不过时间太长的话换下AP,见光不好吧!
44楼2012-11-12 23:25:34
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)



yulanwu0524(金币+1): 谢谢参与
确定APS和TEMED的用量和质量都没问题吗?还有就是丙烯酰胺母液中丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺的比例是否正确?
2楼2012-11-07 07:59:56
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chlorella409

木虫 (正式写手)



yulanwu0524(金币+1): 谢谢参与
过硫酸铵的问题大点,只要有点受潮就不能用。其他会不会是Tris的PH不对,环境温度也有影响,冬天比较难凝固
3楼2012-11-07 08:29:56
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tupac225

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
主要是APS和TEMED的出问题了,aps要配好了,分装成1ml的,一次一管,TEMED应该没什么问题。
4楼2012-11-07 08:31:15
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贝壳v下了

铜虫 (初入文坛)


多加点AP
5楼2012-11-07 08:58:00
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张军90后

新虫 (初入文坛)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-08 13:43:51
大多是APS的问题,它容易失效,我正常在4度的冰箱里放置7天就不用了。如果是冬天的话可能会凝固慢点,可以放置在37度烘箱中即可。
6楼2012-11-07 11:35:49
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-07 07:59:56
确定APS和TEMED的用量和质量都没问题吗?还有就是丙烯酰胺母液中丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺的比例是否正确?

确定没有问题
7楼2012-11-07 12:47:38
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
3楼: Originally posted by chlorella409 at 2012-11-07 08:29:56
过硫酸铵的问题大点,只要有点受潮就不能用。其他会不会是Tris的PH不对,环境温度也有影响,冬天比较难凝固

过硫酸铵确实是有点受潮,那是不是要重新换一下药品啊?
8楼2012-11-07 12:48:42
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
4楼: Originally posted by tupac225 at 2012-11-07 08:31:15
主要是APS和TEMED的出问题了,aps要配好了,分装成1ml的,一次一管,TEMED应该没什么问题。

请问 APS和TEMED能出什么问题 啊?
9楼2012-11-07 12:49:27
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
5楼: Originally posted by 贝壳v下了 at 2012-11-07 08:58:00
多加点AP

谢谢
10楼2012-11-07 12:49:39
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
6楼: Originally posted by 张军90后 at 2012-11-07 11:35:49
大多是APS的问题,它容易失效,我正常在4度的冰箱里放置7天就不用了。如果是冬天的话可能会凝固慢点,可以放置在37度烘箱中即可。

我的APS防止了差不多有一个月左右了  也是在4度 啊?冬天要放置在37度烘箱中吗?
11楼2012-11-07 12:51:06
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-07 07:59:56
确定APS和TEMED的用量和质量都没问题吗?还有就是丙烯酰胺母液中丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺的比例是否正确?

没得问题
12楼2012-11-07 12:51:48
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xudabin98

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我敢跟你打赌,肯定是你的APS出了问题,这个东西最好现配现用,一次配了最好分装,然后放-20度。PAGE胶10多分钟就凝固了,但是假如你想跑出非常漂亮的胶,最好让它凝固时间长一点
16楼2012-11-07 18:16:23
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
6楼: Originally posted by 张军90后 at 2012-11-07 11:35:49
大多是APS的问题,它容易失效,我正常在4度的冰箱里放置7天就不用了。如果是冬天的话可能会凝固慢点,可以放置在37度烘箱中即可。

没听说过啊啊
17楼2012-11-07 19:16:34
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
13楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-07 14:35:57
APS最好是新鲜配制,也可以在配好后分装成,-20°C保存。固体药品如果受潮了就不能用了。

晓得啊
18楼2012-11-07 19:17:33
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
13楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-07 14:35:57
APS最好是新鲜配制,也可以在配好后分装成,-20°C保存。固体药品如果受潮了就不能用了。

晓得啊
19楼2012-11-07 19:19:27
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
16楼: Originally posted by xudabin98 at 2012-11-07 18:16:23
我敢跟你打赌,肯定是你的APS出了问题,这个东西最好现配现用,一次配了最好分装,然后放-20度。PAGE胶10多分钟就凝固了,但是假如你想跑出非常漂亮的胶,最好让它凝固时间长一点

是的
APS的量是有点出入
谢谢
20楼2012-11-07 19:21:10
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chengjg

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
把胶扔了,重做一遍 哈哈
21楼2012-11-07 19:40:49
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charlen520

银虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
过不过夜用没有多大问题,我用的都是好多天前配好的,是不是你的胶没有混匀你就灌胶了?
23楼2012-11-08 10:46:53
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
21楼: Originally posted by chengjg at 2012-11-07 19:40:49
把胶扔了,重做一遍 哈哈

亲 怎么这样啊
24楼2012-11-08 17:56:39
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
22楼: Originally posted by chlorella409 at 2012-11-08 08:34:51
受潮了就肯定不能用了哦,烘干后的效果也不能保证的...

灰常感谢
25楼2012-11-08 17:58:15
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希罗雅

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
主要是APS和TEMED的用量和质量都的问题   我做的是8%的  APS用300UL   TEMED是24.9UL
26楼2012-11-08 21:06:06
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chengjg

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
24楼: Originally posted by yulanwu0524 at 2012-11-08 17:56:39
亲 怎么这样啊...

多加练习才能总结出经验 哈哈
27楼2012-11-09 09:32:51
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wszjll

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by yulanwu0524 at 2012-11-07 12:49:39
谢谢

很简单,东西加错了,如果三十分钟之内还不凝固,肯定要重新再配,凝固时间太长是没用的。我的AP一次配10ml,放冰箱里每次都有用
28楼2012-11-09 10:59:06
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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
90%是AP问题,我们实验室AP用了1/10,后来就失效了,你换别的实验室的AP试试。另外,当时AP出问题后,我们胶放时间长了会析出白色沉淀,你看看有没
29楼2012-11-09 18:41:42
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
13楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-07 14:35:57
APS最好是新鲜配制,也可以在配好后分装成,-20°C保存。固体药品如果受潮了就不能用了。

谢谢提醒
30楼2012-11-09 20:24:52
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
6楼: Originally posted by 张军90后 at 2012-11-07 11:35:49
大多是APS的问题,它容易失效,我正常在4度的冰箱里放置7天就不用了。如果是冬天的话可能会凝固慢点,可以放置在37度烘箱中即可。

应该是过硫酸铵的问题大些
31楼2012-11-09 20:25:35
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
28楼: Originally posted by wszjll at 2012-11-09 10:59:06
很简单,东西加错了,如果三十分钟之内还不凝固,肯定要重新再配,凝固时间太长是没用的。我的AP一次配10ml,放冰箱里每次都有用...

东西没错,是过硫酸铵有点受潮,可能失效了
33楼2012-11-10 13:16:03
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
29楼: Originally posted by hxswdl at 2012-11-09 18:41:42
90%是AP问题,我们实验室AP用了1/10,后来就失效了,你换别的实验室的AP试试。另外,当时AP出问题后,我们胶放时间长了会析出白色沉淀,你看看有没

还是其他药品的问题大些  比如过硫酸铵
34楼2012-11-10 13:16:49
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
26楼: Originally posted by 希罗雅 at 2012-11-08 21:06:06
主要是APS和TEMED的用量和质量都的问题   我做的是8%的  APS用300UL   TEMED是24.9UL

过硫酸铵的问题  可能失效
35楼2012-11-10 13:18:07
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
21楼: Originally posted by chengjg at 2012-11-07 19:40:49
把胶扔了,重做一遍 哈哈

不能用  肯定得扔了
36楼2012-11-10 13:21:03
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
23楼: Originally posted by charlen520 at 2012-11-08 10:46:53
过不过夜用没有多大问题,我用的都是好多天前配好的,是不是你的胶没有混匀你就灌胶了?

是药品问题吧
37楼2012-11-10 13:21:52
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lemond

银虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
10%APS4°冰箱两周照用
40楼2012-11-10 16:44:46
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
40楼: Originally posted by lemond at 2012-11-10 16:44:46
10%APS4°冰箱两周照用

晓得啊   是药品本身可能过期吧   谢谢
41楼2012-11-11 21:26:29
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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
34楼: Originally posted by yulanwu0524 at 2012-11-10 13:16:49
还是其他药品的问题大些  比如过硫酸铵...

晕!我说的ap就是指过硫酸胺……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
42楼2012-11-12 08:01:07
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yulanwu0524

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
42楼: Originally posted by hxswdl at 2012-11-12 08:01:07
晕!我说的ap就是指过硫酸胺……
...

嗯   晓得
43楼2012-11-12 20:01:52
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hbbeijibing

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问各位高手,6%的变性聚丙烯酰胺胶配方是啥?
45楼2012-11-27 13:51:08
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简单回复
2012-11-10 13:22   回复  
引用回帖:
27楼: Originally posted by chengjg at 2012-11-09 09:32:51 多加练习才能总结出经验 哈哈...

2012-11-10 13:22   回复  
引用回帖:
28楼: Originally posted by wszjll at 2012-11-09 10:59:06 很简单,东西加错了,如果三十分钟之内还不凝固,肯定要重新再配,凝固时间太长是没用的。我的AP一次配10ml,放冰箱里每次都有用...

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