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xiaozengzeng

金虫 (初入文坛)

[求助] PCR跑电泳只出现marker,附图 哪位大侠分析下原因啊

检测APP/PS1转基因小鼠阴阳性,条带只出现marker,引物母液APP-F15.8皮摩尔每微升,APP-R 15.8皮摩尔每微升,PS1-F 15.9皮摩尔每微升,PS1-R17.8皮摩尔每微升.

八个样品体系,                                             
水         115.2微升
buffer   16微升
DNTPS   8微升
taq         0.8微升
DMSO     8微升
APP-F    6.329微升
APP-R    6.329微升
PS1-F    6.289微升
PS1-R    5.618微升
电泳30分钟,120V。
2012-11-6.jpg
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choukeitou

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1.gel 浓度过高。
2.genome DNA 的状态不是很好
3.没有 positive control
4.DMSO 的添加也不是必须的。
5.band 有点 smera.

建议用现在的primer,用转基因的小鼠的plasmid DNA 做为positive control, 找到适宜的Tm.
9楼2012-11-11 08:00:20
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