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陶籽

铜虫 (初入文坛)

[求助] 水溶性高分子聚合物GPC

我刚接触分子量的分布着一块,我的样品是发酵的提取液,水溶性,根据文献报道分子量分布很宽,我该从哪里下手?
我们这里的GPC柱子只有两根,安捷伦PL aquagel-OH
MIXED-M 8 μm  MW Range (g/mol) (PEG/PEO)  为100-100,000,000  以及PL aquagel-OH 20   MW Range (g/mol) (PEG/PEO)  为100-10,000  色谱柱。求指教~~
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必须非常努力,才能看起来毫不费力~~
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disl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
??查一下柱??的说明书。在测定水溶性的高分??应加入少??的??,如??酸钠。有时还加入乙腈。一般??超过20%(v/v)
这是个乐园。
7楼2012-11-06 17:55:56
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陶籽

铜虫 (初入文坛)

???????:
7?: Originally posted by disl at 2012-11-06 17:55:56
??查一下柱??的说明书。在测定水溶性的高分??应加入少??的??,如??酸钠。有时还加入乙腈。一般??超过20%(v/v)

?????????嶼??????~~лл~~
必须非常努力,才能看起来毫不费力~~
10楼2012-11-06 19:02:18
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petersa200

木虫 (小有名气)

分子量分布再宽总有一个Mw吧,你这个MIXED能做到这么大的上限?100M。。。你这个发酵提取液的分子量到底有多大。
2楼2012-11-06 11:13:04
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Pureland

木虫之王 (知名作家)

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感谢参与,应助指数 +1
Meteorの泪: 金币+1, 欢迎交流 2012-11-06 17:00:04
GPC柱子的分离范围是一方面,还与PEG标样的大小有关,比如说PEG标样最小的Mw是500,那么能最小分子量也就是500。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2012-11-06 11:39:30
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陶籽

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by petersa200 at 2012-11-06 11:13:04
分子量分布再宽总有一个Mw吧,你这个MIXED能做到这么大的上限?100M。。。你这个发酵提取液的分子量到底有多大。

文献报道,分子量大约在几百到几十万,对于这个说法我很无语~~
其次就是有用膜分离的方式研究分子量的,利用不同孔径的透析袋,结论是大约十万的部分占到将近80%,其次是小于3500的,占到10%~~这是我看到的做这个样品分子量最具体的一个~~
MIXED他的说明书是这个样子的~~PL系列柱子中最大的~~那个20是此系列中最小的~~谢谢~~
必须非常努力,才能看起来毫不费力~~
4楼2012-11-06 15:13:39
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陶籽

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Pureland at 2012-11-06 11:39:30
GPC柱子的分离范围是一方面,还与PEG标样的大小有关,比如说PEG标样最小的Mw是500,那么能最小分子量也就是500。

我还没有做到标曲的那一部分,我是想先做样品,通过不断的更改条件来调整峰型,确定条件后再去跑标曲,难道我的顺序错了?
PEG是常用的标样吗?在不了解样品结构,只了解器官能团的情况下,如何选择与其结构类似的标品,谢谢~~
必须非常努力,才能看起来毫不费力~~
5楼2012-11-06 15:18:33
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petersa200

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 陶籽 at 2012-11-06 15:13:39
文献报道,分子量大约在几百到几十万,对于这个说法我很无语~~
其次就是有用膜分离的方式研究分子量的,利用不同孔径的透析袋,结论是大约十万的部分占到将近80%,其次是小于3500的,占到10%~~这是我看到的做这个 ...

分子量在10w的物质用那么大量程的色谱柱分离。。。都不一定是在色谱柱线性范围之内。建议选择较低的,大概500w就够了。。
6楼2012-11-06 17:32:50
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disl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

查一下色谱柱的使用说明。
这是个乐园。
8楼2012-11-06 17:57:27
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Pureland

木虫之王 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 陶籽 at 2012-11-06 15:18:33
我还没有做到标曲的那一部分,我是想先做样品,通过不断的更改条件来调整峰型,确定条件后再去跑标曲,难道我的顺序错了?
PEG是常用的标样吗?在不了解样品结构,只了解器官能团的情况下,如何选择与其结构类似的 ...

应该是先做标准曲线的。PEG是水相GPC常用的标样。GPC测的是相对分子量,即相对标样的分子量,具有很广的应用。如果要得到真实的分子量可以选择静态光散射。
9楼2012-11-06 19:01:05
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