应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌落PCR与扩繁后提取质粒PCR
汕头大学海洋科学接受调剂
51/1返回列表
查看: 2619  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

丁香王子

铜虫 (初入文坛)

[交流] 菌落PCR与扩繁后提取质粒PCR

大家好，我连接后的克隆体经转化后菌落PCR检测有目的片段，扩繁提取质粒后却检测不出目的片段，请问是什么原因，谢谢！Sample Text
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-11-05 09:22:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿留申

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般情况下菌液PCR出现假阳性的情况比较多。正常情况下，我们都是做菌液PCR(或者质粒做模版的PCR)+酶切鉴定，两个都是阳性的情况下基本上是没什么问题的。不知道对你有没有帮助！
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2012-11-05 11:17:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

susizheng

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
（1）质粒当模板的时候，量要少，稀释几个梯度试试。
（2）直接做酶切鉴定就行了。
赞一下 回复此楼
2楼2012-11-05 10:50:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by susizheng at 2012-11-05 10:50:24
（1）质粒当模板的时候，量要少，稀释几个梯度试试。
（2）直接做酶切鉴定就行了。

同意楼上，菌落PCR不是太靠谱，只能做参考，可以测序，PCR时，质粒浓度不能太大
赞一下 回复此楼
4楼2012-11-05 11:19:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
菌落PCR可能有假阳性，最后还是提质粒做鉴定。用质粒为模板只需pg级，一般我都是用枪头沾一下混在PCR体系就可以了。不怕麻烦的话可以把质粒模板稀释1000倍。
赞一下 回复此楼
5楼2012-11-05 14:03:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂学校 +11 不会吃肉 2026-04-13 12/600 2026-04-14 19:38 by Art1977
[基金申请] 山东省基金2026 +6 jerry681 2026-04-08 8/400 2026-04-14 19:28 by laobibibi
[考研] 恳请有学校收留 +3 柯淮然 2026-04-12 3/150 2026-04-14 16:25 by 逆水乘风
[考研] 复试调剂 +18 积极向上； 2026-04-10 20/1000 2026-04-14 16:11 by zs92450
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +25 ioodiiij 2026-04-08 25/1250 2026-04-14 15:59 by zs92450
[考研] 一志愿沪9，326求生物学调剂 +10 刘墨墨 2026-04-13 10/500 2026-04-14 15:16 by zs92450
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] B区0809 ，数一英一，290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 346分，工科0854求调剂，专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 电气工程专硕320求调剂 +5 小麻子111 2026-04-10 5/250 2026-04-12 10:47 by zhouyuwinner
[考研] 284求调剂 +11 archer.. 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:23 by 蓝云思雨
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 一志愿东北大学控制工程085406数二英二385，求调剂 +8 Ezra_Zhang 2026-04-09 8/400 2026-04-11 09:15 by 猪会飞
[考研] 337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 08:57 by zhq0425
[考研] 求调剂 +5 不会飞的鱼@ 2026-04-10 5/250 2026-04-10 19:07 by chemisry
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 13/650 2026-04-10 10:27 by liuhuiying09
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550， 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
[考研] 334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 09:28 by wdyheheeh
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭