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金虫 (正式写手)

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专业: 免疫生物学

[求助] 线粒体内膜蛋白转定位表达在细胞膜上

大家好，最近有个非常急的问题，我想把一个线粒体内膜定位的蛋白（metabolite carrier）转定位到细胞膜上，然后我问了很多人，都说什么cut掉自己的信号肽，加上细胞膜定位的信号肽就行了，但是真的不行。
这个蛋白的信号肽定位在蛋白中间首先不知道在哪些氨基酸上面其次如果突变怕影响膜蛋白结构和转运功能
还有根本就查不到真核蛋白的信号肽
不知道有经验的虫友有没有知道哪些比较经常用的细胞膜定位的信号肽吗？（最主要的问题，重要！）
还有如果我想把GFP连接到这个蛋白后面，是不是应该把信号肽连接在GFP后面啊？
请问用什么表达载体呢？我想构建稳定细胞系。
克隆这个蛋白的时候是克隆CDS还是克隆mRNA（比较CDS多了3‘UTR和5’UTR）？
非常感谢啊！

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