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2011加油

银虫 (正式写手)


[交流] RT-PCR引物稀释问题,欢迎战友们进来指导!急盼中

大家好,我的引物是交给英骏公司合成,之前没进行过引物稀释,大家帮忙看看我将这样配制是否正确,我需要的引物终浓度为10umol/L。以其中一管引物为例:nmols per OD=4.4,每管为1OD,离心后,先加入10ul DEPC水稀释成100umol/L母液,混匀,再取出100ul母液加入900ulDEPC水,混匀,即得10umol/L溶液。

另外,稀释的溶液说法不一,有用灭菌后的超纯水、TE溶液、DEPC水,是不是进行RT-PCR实验,采用DEPC水更好一些??

最后,英骏公司的DNA合成说明书背面,我有一些看不明白,给出这个信息
Scale of Synthesis:100nmole想说明的是什么哦??
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)


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2011加油: 金币+2, 呵呵,谢谢,那我明白了,每管有多少nmol,就先加入它10倍量的DEPC水变成母液。 2012-11-02 08:20:16
引用回帖:
4楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-11-01 20:22:15
是开始加44ul depc水形成母液的吧

是啊,我也是刚和师兄学习的嘿嘿
8楼2012-11-01 22:18:10
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2011加油

银虫 (正式写手)


有点错误了,需要更正一下,第一步先加44ul DEPC水,形成母液100umol/L。
2楼2012-11-01 19:50:25
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2011加油

银虫 (正式写手)


再去10ul母液加入90ul DEPC水,混匀,即得。
3楼2012-11-01 19:54:29
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)


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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
2011加油: 金币+2, 是的,谢谢交流,是按照后面更正的来计算不?盼回复 2012-11-01 21:42:44
2011加油: 回帖置顶 2012-11-02 14:40:07
是开始加44ul depc水形成母液的吧
4楼2012-11-01 20:22:15
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