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2011加油

银虫 (正式写手)

MolEPI: 1
应助: 9 (幼儿园)
金币: 722.8
帖子: 382
在线: 177.9小时
虫号: 1210848

[交流] RT-PCR引物稀释问题，欢迎战友们进来指导！急盼中

大家好，我的引物是交给英骏公司合成，之前没进行过引物稀释，大家帮忙看看我将这样配制是否正确，我需要的引物终浓度为10umol/L。以其中一管引物为例：nmols per OD=4.4，每管为1OD，离心后，先加入10ul DEPC水稀释成100umol/L母液，混匀，再取出100ul母液加入900ulDEPC水，混匀，即得10umol/L溶液。

另外，稀释的溶液说法不一，有用灭菌后的超纯水、TE溶液、DEPC水，是不是进行RT-PCR实验，采用DEPC水更好一些？？

最后，英骏公司的DNA合成说明书背面，我有一些看不明白，给出这个信息
Scale of Synthesis:100nmole想说明的是什么哦？？

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1楼2012-11-01 19:48:36

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caoxin1984

铜虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
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虫号: 1972421

★
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稀释引物的溶液确实好多，灭菌后的超纯水、TE溶液、DEPC水均可，对后续进行RT-PCR实验影响不大。
但有报道显示，引物在偏酸性的溶液中易降解（超纯水很多偏酸性），采用偏碱性的TE溶液对于引物的长期保存会更好一些

15楼2012-11-02 17:17:17

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