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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 细胞凋亡实验，请教消化问题，欢迎大家前来指导
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2011加油

银虫 (正式写手)

[交流] 细胞凋亡实验，请教消化问题，欢迎大家前来指导

大家好，我最近头一回做了凋亡实验，可能是消化（不含EDTA胰酶）没有掌握好，导致溶剂对照组中出现较多的早期凋亡细胞（30%多的比例），收集前显微镜下观察该组细胞时，没有太多细胞出现脱落，从得到结果分析，有可能是消化过度了，造成假阳性结果。我铺板是6孔板，请问大家每孔加入多少胰酶，是否是看到细胞变圆未脱落前，就开始终止消化，这样的效果会较好吗？？？请战友们多多指导，求下回实验顺利！谢谢大家
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1楼2012-11-01 09:27:15
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简若

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你是什么细胞啊，我做的细胞一般加0.5ml，细胞开始大面积脱落时就立马终止，一般2-3min，和你实验室的温度也是有关系的！
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19楼2013-04-02 21:38:33
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jiangyinshen

木虫 (著名写手)
★ ★
2011加油(金币+1): 谢谢参与
2011加油: 金币+1, 谢谢交流，我只加了每孔0.5毫升，它都容易过度了哦 2012-11-01 11:30:15
六孔板加1ml胰酶足矣，消化不要超过5min，否则对细胞不好
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2楼2012-11-01 09:56:48
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piaoyingaza

木虫 (著名写手)
★ ★
2011加油(金币+1): 谢谢参与
2011加油: 金币+1, 谢谢顶贴，1毫升有可能还是多了哦 2012-11-01 11:30:42
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiangyinshen at 2012-11-01 09:56:48
六孔板加1ml胰酶足矣，消化不要超过5min，否则对细胞不好

受教了
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3楼2012-11-01 09:57:25
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448935271

银虫 (小有名气)
★ ★
2011加油(金币+1): 谢谢参与
2011加油: 金币+1, 谢谢交流，你一般每孔加多少胰酶哦，请不吝赐教，急盼再回复，哈哈 2012-11-01 11:33:36
"细胞变圆未脱落前，就开始终止消化"这是必须的
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6楼2012-11-01 10:50:45
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