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细胞凋亡实验,请教消化问题,欢迎大家前来指导
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2011加油
银虫
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[交流]
细胞凋亡实验,请教消化问题,欢迎大家前来指导
大家好,我最近头一回做了凋亡实验,可能是消化(不含EDTA胰酶)没有掌握好,导致溶剂对照组中出现较多的早期凋亡细胞(30%多的比例),收集前显微镜下观察该组细胞时,没有太多细胞出现脱落,从得到结果分析,有可能是消化过度了,造成假阳性结果。我铺板是6孔板,请问大家每孔加入多少胰酶,是否是看到细胞变圆未脱落前,就开始终止消化,这样的效果会较好吗???请战友们多多指导,求下回实验顺利!谢谢大家
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2012-11-01 09:27:15
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2011加油
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11楼
:
Originally posted by
churchill87426
at 2012-11-01 19:42:02
我们6孔板都是只加200ul胰酶。。。
恩,确实加少一些更合适,我这回加了哦0.5毫升,它消化过度了哦。然后你是等到细胞变圆未脱落,就停止消化不?盼再回复,谢谢啊。
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12楼
2012-11-01 21:39:14
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jiangyinshen
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★ ★
2011加油(金币+1): 谢谢参与
2011加油: 金币+1, 谢谢交流,我只加了每孔0.5毫升,它都容易过度了哦
2012-11-01 11:30:15
六孔板加1ml胰酶足矣,消化不要超过5min,否则对细胞不好
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2楼
2012-11-01 09:56:48
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piaoyingaza
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★ ★
2011加油(金币+1): 谢谢参与
2011加油: 金币+1, 谢谢顶贴,1毫升有可能还是多了哦
2012-11-01 11:30:42
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
jiangyinshen
at 2012-11-01 09:56:48
六孔板加1ml胰酶足矣,消化不要超过5min,否则对细胞不好
受教了
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3楼
2012-11-01 09:57:25
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银虫
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2011加油(金币+1): 谢谢参与
2011加油: 金币+1, 谢谢交流,你一般每孔加多少胰酶哦,请不吝赐教,急盼再回复,哈哈
2012-11-01 11:33:36
"细胞变圆未脱落前,就开始终止消化"这是必须的
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6楼
2012-11-01 10:50:45
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