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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 微生物、发酵 » 毕赤酵母发酵问题求助
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iris871110

新虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母发酵问题求助

本人做重组毕赤酵母表达木聚糖酶，所用表达系统为GS115和pPIC9K，重组子为Mut+型。2.5升发酵罐，BSM培养基，在流加甲醇时遇到问题。我的溶氧曲线不降，刚流加速度为3ml/h/l时溶氧在62%基本稳定，随后逐渐增加到6ml/h/和9ml/h/，溶氧不降且缓慢上升至74%。诱导12个小时测酶活是600U/mL,镜检菌体有部分死亡的现象，而且pH值一直在6，没有氨水的调节。想问问各位有没有相关实验经验，主要是溶氧曲线为什么不降？谢谢
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1楼 2012-10-30 19:52:31
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dxh011

新虫 (初入文坛)
甲醇前期补料太快，细胞消耗不完，导致甲醇积累过量中毒，细胞不繁殖怎么消耗溶氧
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5楼2015-05-12 14:17:20
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a404467415

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我做的也是毕赤酵母产 胶原蛋白的，在甲醇诱导开始后6h后溶氧一直慢慢的升高，重新补甘油溶氧迅速下降。以前的发酵都好好的，诱导时甲醇都可以利用，这次出现这种问题  不解不解，请各位大侠指点！
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TheLordpreferscommon-lookingpeople.Thatisthereasonhemakessomanyofthem.
2楼2012-11-01 08:46:12
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iris871110

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by a404467415 at 2012-11-01 08:46:12
我做的也是毕赤酵母产 胶原蛋白的，在甲醇诱导开始后6h后溶氧一直慢慢的升高，重新补甘油溶氧迅速下降。以前的发酵都好好的，诱导时甲醇都可以利用，这次出现这种问题  不解不解，请各位大侠指点！

同病相怜
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3楼2012-11-08 23:08:27
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Microol

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-12-11 07:21:59
基于以上两位对毕赤酵母甲醇诱导阶段问题的表述，个人觉得是两位对甲醇流加的速率控制和毕赤酵母利用甲醇能力偏差太大，所以导致发酵罐内甲醇浓度太高，或者太低，都导致酵母出现死亡现象。
     一般诱导阶段刚开始的几个小时，要缓慢的增加甲醇流加量，这样酵母就可以及时产生醇氧化酶，就会消耗多一点的甲醇。如果甲醇流加速率增加太快，酵母还没有来得及产生足量的醇氧化酶，过量的甲醇就把毕赤酵母毒死了（毒死是因为甲醇是有机小分子，对细胞有很强的渗透作用，对细胞壁也有不利的作用）。
希望能帮到你们
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看看再发言
4楼2012-12-06 23:36:05
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