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PAGE胶的预混合问题
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赵志鹏爱生物
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[交流]
PAGE胶的预混合问题
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PAGE胶不加入APS和TEMED促凝的话,和其他东西(水,Tris-HCL)可以提前混好么?why?
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1楼
2012-10-30 06:11:04
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joan198108
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只是不提前加TEMED就可以了,因为Acr及Bis的交联反应需要引发剂的催化才能够发生。PAGE胶的相关资料里都有介绍的,楼主可以看一下。
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2楼
2012-10-30 08:44:57
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cicelyzh
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专业: 生物化学
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你说的提前混好是什么意思?其他组分当然要先混好再加APS和TEMED了。APS提供交联时所需的自由基,TEMED是催化剂。不加这两样胶几乎不能凝。当然所谓提前也不宜时间过长,因为光也可以催化交联,只是反应非常缓慢。所以丙烯酰胺STOCK最好避光保存。
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3楼
2012-10-30 08:49:18
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dy_414
木虫
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专业: 基因表达调控与表观遗传学
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TEMED是催化剂,APS提供自由基,属于加速剂
混合后用着比较方便,但是Acry的粘度会增加,而且不同的样品需要用不同的浓度。
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我坚信,rp是攒出来的
4楼
2012-10-30 10:07:05
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piaoyingaza
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不行,因为30%Acr/Bis见光分解,需要严格避光保存,最好保存在四度环境
建议楼主还是不要预混了,不太好
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5楼
2012-10-30 10:07:34
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jiangyinshen
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专业: 生殖生物学
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楼主没有必要提前预混啊,况且不同的蛋白用的胶浓度也不一样,干吗要预混啊,用的时候现配就行,不麻烦的
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不是風動,亦非幡動,仁者心動
6楼
2012-10-30 10:15:04
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