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简单HE认真

木虫 (小有名气)

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[交流] 蛋白纯化实验用柱子的维护问题？

我们蛋白纯化常用的柱子有GST、镍柱，每次用完之后要及时清洗吗？该如何清洗呢？实验时常常没有一个较标准的操作，我想把对柱子的损伤降到最低，请教各位大侠，给点意见，小妹在此谢过啦！

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1楼2012-10-25 08:49:52

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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

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说明书是干嘛用的呢？？？？？？？？？？？

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5楼2012-10-25 23:16:03

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linxt2005

金虫 (小有名气)

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小丹木木: 金币+3, 鼓励积极交流经验 2012-10-26 08:03:06
简单HE认真: 金币+5 2012-10-29 18:56:00

填料的维护主要是体现在3个方面：
１.层析过程维护：需要注意使用的层析缓冲液的类型，各种试剂，操作压力；
２.使用后的处理：比如层析过程出现沉淀，可以用变性剂进行处理，ＮaOH等，柱子再生，再生方法需要参考说明书；
３.保存：柱子的保存需要在特定的溶液里，比如２０%酒精等。

这些填料的维护方法需要根据母体的成分来确定，比如　sephadex 或者　sepharose　的区别还是挺大的。
至于ＧＳＴ，Ｎi只是作为配基，需要明确这一点先，然后再来讨论，
我觉得最简单的方法就是遵照说明书。

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2楼2012-10-25 12:51:03

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