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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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applexixixi

木虫 (小有名气)


[交流] 想扩增10kb多的基因簇,现在有什么技术可以一次性扩增出来吗

10kb多的基因簇是连续的,想扩增出来,在此问问虫友们现在有什么技术可以解决这个问题呢?
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zhwenxing

木虫 (著名写手)


★ ★ ★
applexixixi(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-27 13:46:00
1、很多长片段扩增酶类具有能力达到10kb,但模板需要相当“平滑”
2、先用软件分析一下看看有没有容易形成二级结构的区域,GC比较集中的“岛”
3、设计引物也非常关键,pcr的条件需要摸索
4、尝试一下吧,你扩增出来,就会有一大片粉丝啦!
13楼2012-10-24 22:53:19
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)



applexixixi(金币+1): 谢谢参与
你这够呛吧……分两三段用高保真酶PCR出来再连接呗
2楼2012-10-24 19:17:23
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polepolar

银虫 (初入文坛)



applexixixi(金币+1): 谢谢参与
可以试一下Phusion聚合酶,据说可以一次扩增10k多.
3楼2012-10-24 21:43:12
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wuyun123

禁虫 (著名写手)


applexixixi(金币+1): 谢谢参与
本帖内容被屏蔽

8楼2012-10-24 21:55:46
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