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liufei2008

金虫 (小有名气)

[求助] 不同高效液相仪器的图谱分歧很大求解

最近做了一些关于人工牛黄胆红素含量测定的实验,一个奇怪的现象出来了。开始我用高效液相是岛津的20A自动进样10ul,样品、对照峰型都很好。后来我用的SSI手动进样20ul和安捷伦1100手动进样20ul出现的结果是主峰前边有一个不明的峰,峰高不大,但是宽度大。求解这是怎么回事,下边附件里是一个用安捷伦1100手动进样出的图谱对照的。[ Last edited by karl2100 on 2012-10-24 at 21:13 ]
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挨打也是好事!学习才是王道
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lhg0209asd

银虫 (正式写手)


karl2100: 金币+1, 3Q 2012-10-24 21:14:32
不确定因素太多,比如
1.样品是否改变
2.流动相是否变化(特别是酸度)
3.是否重复进样之后才有?
2楼2012-10-22 12:46:00
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lhp123789

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢! 2012-10-24 21:14:54
看你的进样量不一样,不过感觉不会有那么大的影响,是否是同一根色谱柱,看看是不是针或者检测器污染了
3楼2012-10-22 13:41:53
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yumulin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢回帖! 2012-10-24 21:15:13
主峰前的这个疑似不明的峰,扩展是很严重的,首先要考虑,这个峰是否是柱子残留、上针没走完的峰。解决方法走一长针,2、3倍你的分析时间,看好后面是否有未走出的物质,另外重复几针,该鬼峰是否有变化。
4楼2012-10-22 13:46:24
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liufei2008

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lhg0209asd at 2012-10-22 12:46:00
不确定因素太多,比如
1.样品是否改变
2.流动相是否变化(特别是酸度)
3.是否重复进样之后才有?

样品没有变,流动相也没有变化,流动相用的氯仿-甲醇-0.1%磷酸=6:88:6;不是重复进样才有,每次进样都有,对照也有
挨打也是好事!学习才是王道
5楼2012-10-22 15:51:49
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liufei2008

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lhp123789 at 2012-10-22 13:41:53
看你的进样量不一样,不过感觉不会有那么大的影响,是否是同一根色谱柱,看看是不是针或者检测器污染了

是相同的色谱柱,只是用的高效液相仪器不一样,一个是手动的,一个是自动进样的。
挨打也是好事!学习才是王道
6楼2012-10-22 15:52:42
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liufei2008

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yumulin at 2012-10-22 13:46:24
主峰前的这个疑似不明的峰,扩展是很严重的,首先要考虑,这个峰是否是柱子残留、上针没走完的峰。解决方法走一长针,2、3倍你的分析时间,看好后面是否有未走出的物质,另外重复几针,该鬼峰是否有变化。

应该不是柱子残留的,我用甲醇水1:9冲了2个小时然后冲的流动相,进了一针样品是这样,然后进样对照还是这样。重复几次没有明显变化。残留情况的确是存在的,但是不是残留的原因、
挨打也是好事!学习才是王道
7楼2012-10-22 15:55:47
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clcivilian

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

8楼2012-10-23 09:48:44
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注册这名字

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 多谢提供! 2012-10-24 21:16:12
正常现象,仪器不一样是这样的,我以前做一个产品,在Waters上面没有某个峰,但是人家客户发来的图上面就有那个峰,客户用的Agilent1200,客户要求我们打Agilent的图给他们,我们公司就去买了Agilent1200,然后同样的条件上机,发现果然有那个峰,然后到Waters上面就没有。这个跟仪器有很大关系,当时知道原因,后来给忘了。。。
没有个性
9楼2012-10-23 10:09:09
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢参与讨论! 2012-10-24 21:16:41
对比一下几张谱图的峰面积。
①岛津20A自动进样10ul,SSI手动进样20ul和安捷伦1100手动进样20ul的胆红素峰面积是否接近1:2:2的关系;
②岛津20A自动进样10ul 可以再进一针看是否有前面的峰。
③如果岛津20A自动进样10ul 主峰前没有宽峰,是否胆红素主峰面积+主峰前宽峰面积=岛津20A自动进样10ul 胆红素主峰面积;
④如果主峰前宽峰也是胆红素的,是否因柱子损坏,0.1%磷酸pH接近2,不知楼主柱子耐受范围是多少?如果耐受范围是2-8,可能因为及时冲洗柱子损坏导致。
疏于学识,望高手赐教,本人之前也遇到过这样的问题,只可惜那柱子后来没用了,问题也就不了了之了。
归零
10楼2012-10-23 10:19:10
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