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绿草如茵

木虫 (小有名气)

[求助] 求原位杂交的技术protocol

大家好,本人最近想做植物组织切片的原位杂交,以前做过都失败了,现在还需要做,求具体的操作流程,谢谢!不胜感激!
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路漫漫其修远兮,吾将上下而求索!
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绿草如茵

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chenguestc at 2012-10-18 11:03:40
1.        制片
2.        制片处理:滴加50-100µL 70%的甲酰胺(用2×SSC配置),盖上盖片。
80℃处理2min, 拿出后迅速甩掉盖片。迅速依次放到-20℃预冷的梯度酒精中(70%,95%,100%酒精各5min或以上)。
3.        处理完 ...

谢谢,不胜感激!
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索!
3楼2012-10-18 12:58:02
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绿草如茵

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chenguestc at 2012-10-18 11:03:40
1.        制片
2.        制片处理:滴加50-100µL 70%的甲酰胺(用2×SSC配置),盖上盖片。
80℃处理2min, 拿出后迅速甩掉盖片。迅速依次放到-20℃预冷的梯度酒精中(70%,95%,100%酒精各5min或以上)。
3.        处理完 ...

“  7.5µL”请问这是什么意思?我不太理解,谢谢!
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索!
4楼2012-10-18 13:00:36
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绿草如茵

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by chenguestc at 2012-10-18 13:39:29
微升。
拷贝的时候乱码了。。。。。

“Probe(最后关灯加)         1µL
你好,请问你是做的植物组织的原位杂交吗?你的探针浓度和杂交温度都是多少?B-DNA哪里买的啊?不好意思,问题太多了!不胜感激!
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索!
6楼2012-10-23 10:46:58
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