应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Klenow Fragment酶的用量问题
汕头大学海洋科学接受调剂
51/1返回列表
查看: 1903  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

phoebeww

铜虫 (小有名气)

[求助] Klenow Fragment酶的用量问题

我实验中需要用的这种酶，说明书中说到活性定义是”37℃30分钟内，催化10nmol dNTPs掺入到多聚核苷酸中所需要的酶量定义为一个活性单位“我现在要催化加入dNTPs的量是400nmol，应该加入的酶是多少U啊？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-10-17 15:25:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linxt2005

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
phoebeww: 金币+2 2012-10-20 09:23:22
过量对实验有影响吗？
这个酶市面上买得挺便宜的了，而且一般都是删除了其外切酶活性的，所以我觉得过量点用以保证实验结果问题不大。
另外，在不同的反应体系中，受到不同因素的影响，酶的活力可能会有所不同，其活性单位可以做个参考，但若是严谨地进行操作，一般都是需要通过预实验后再确定的吧。
赞一下 回复此楼
小兵一个
9楼2012-10-19 09:42:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

361440594

木虫 (小有名气)

大神

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
phoebeww: 金币+2 2012-10-18 21:25:18
照你这个说明书上的计算，加入量不就是400÷10=40U吗？然后看看Klenow聚合酶的浓度是10U/微升，还是5U/微升，算出所加的聚合酶的量。
赞一下 回复此楼
Hero
2楼2012-10-17 21:51:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ycyyvonne

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
phoebeww: 金币+2 2012-10-18 21:24:08
是不是要用这么多哦，查下相关文献中用的是多少哟，我看到的有基本上有用10U的，我自己用过5U和2.5U，这个酶的活性还是比较高的
赞一下 回复此楼
3楼2012-10-18 08:29:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shixiaba

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-10-18 18:41:22
phoebeww: 金币+2 2012-10-18 21:27:19
理论上讲肯定是40单位37摄氏度30min内完全催化了。可是说明书上给的肯定是保守数据，而且楼主估计也是做检测分析的，自然没有必要用这么高的量。所以40单位是上限。
赞一下 回复此楼
4楼2012-10-18 09:05:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 366求调剂 +11 不知名的小卅 2026-04-11 11/550 2026-04-14 15:50 by zs92450
[考研] 302求调剂 +10 易！? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 考研二轮调剂 +10 故人?? 2026-04-09 10/500 2026-04-13 09:55 by szhize
[考研] 求调剂，262机械专硕 +8 嗯yyl 2026-04-08 8/400 2026-04-12 02:31 by 秋豆菜芽
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-08 9/450 2026-04-12 02:24 by 秋豆菜芽
[找工作] 山东高校教师考核超级无底线，员工过不下去啦 +4 qut2026 2026-04-09 9/450 2026-04-12 00:54 by qut2026
[考研] 调剂 +6 青灯不负 2026-04-09 6/300 2026-04-11 20:35 by dongdian1
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +7 汪某. 2026-04-09 7/350 2026-04-11 14:37 by luhong1990
[考研] 22408调剂求助 +7 毂12 2026-04-09 9/450 2026-04-11 09:23 by 哦哦123
[考研] 284求调剂 +12 archer.. 2026-04-10 13/650 2026-04-11 08:44 by zhq0425
[考研] 085506-求调剂-285分 +3 雷欧飞踢 2026-04-08 3/150 2026-04-11 08:37 by zhq0425
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
[考研] 一志愿华东师范生物学326分，求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 调剂申请086000一志愿西北农林科技大学生物与医药320分-本科齐鲁工业大学 +3 美美女士 2026-04-09 3/150 2026-04-10 10:31 by liuhuiying09
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 085801 总分275 本科新能源 求调剂 +8 bradoner 2026-04-08 9/450 2026-04-09 13:43 by only周
[考研] 283电子信息求调剂 +4 三石WL 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:21 by wp06
[考研] 招收有机化学、化工，药学，食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭