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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 硫酸苯酚法测定多糖含量中量的问题
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点点tina

金虫 (小有名气)

[求助] 硫酸苯酚法测定多糖含量中量的问题

我做的标准曲线是比较好的，R2在0.99以上。我做多糖的提取之后算出来的多糖的含量极其少，在0.14mg/ml以下，可是它应该的范围是在4mg/ml左右，我想知道是否是硫酸苯酚法的问题呢？还是怎样呢？
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努力分离，好好解谱
1楼 2012-10-15 21:54:06
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guoheizi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2012-10-16 23:19:47
我现在在做多糖 r2 两个9 其实不计较的话也可以的。问题的关键是你（ 称取了1.2g定容到了250m ）这个多糖全溶解了么？多糖是大分子溶解性实际上是比较差的某些情况下。还有你是要测定你除完蛋白以后这个物质里面的含糖量么？你的标准品溶液的浓度你确定好了昂？呵呵 我用过这个方法测定糖含量 方法学上肯定没问题。
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7楼2012-10-16 21:27:27
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632295417

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
点点tina: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-16 21:53:29
你用的是葡萄糖的标准曲线吗？你的曲线范围貌似有点大啊。你说的不是特别清楚啊。我说一下我做的吧，线性范围是10-50微克，把供试品稀释到那个范围内进行测定的。我的供试品要是你那么大的浓度的话，吸光度会很大很大。一般吸光度要求要小于1的
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坚强勇敢的活着
2楼2012-10-16 10:25:48
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点点tina

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 632295417 at 2012-10-16 10:25:48
你用的是葡萄糖的标准曲线吗？你的曲线范围貌似有点大啊。你说的不是特别清楚啊。我说一下我做的吧，线性范围是10-50微克，把供试品稀释到那个范围内进行测定的。我的供试品要是你那么大的浓度的话，吸光度会很大很 ...

我用的是0.1mg/ml的多糖溶液，做出来的标准曲线是最大的0.015mg/ml吸光值是0.798.标准曲线是没有问题的。我说的数据是稀释后的，应该是稀释一百倍之后到0.70左右，可是我提取出来的是十倍之后0.7。所以我才想说是不是硫酸苯酚法有些测量不出来呢？
不好意思，这个实在是觉得数据太不靠谱了 谢谢
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努力分离，好好解谱
3楼2012-10-16 12:26:24
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632295417

木虫 (正式写手)
0.1mg/ml的多糖溶液是纯品，标准品吗？？你的意思是，标准品稀释100倍是0.7，你提的是稀释10倍0.7？我个人认为这个方法应该是没有问题的，不知道你是哪步计算错了，还是什么的。
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坚强勇敢的活着
4楼2012-10-16 13:54:35
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