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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 测定提取总RNA浓度
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821078607

银虫 (小有名气)

[求助] 测定提取总RNA浓度

大家好！请教一个问题，提取总RNA后，大家一般用DEPC水稀释多少倍测吸收，使用的仪器是紫外吸收吗？池子是白色两面透光的石英池吗？本来我提取的量很少，这样会不会损失太多。
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1楼 2012-10-11 18:58:35
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-12 15:42:29
我一般就是取10uL到60uL体系，测260和280；做转录的时候也用过5uL到100uL体系的，用于测量的我一般就不用了。稀释的话还要看你提的量的多少，一般池子的最小体积就是60uL。
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2楼2012-10-11 22:12:18
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-12 15:42:19
821078607: 金币+3, ★有帮助 2012-10-14 22:36:35
以前用岛津UV2401PC，石英比色皿，2微升样品加998微升水，测出结果在要求不是很严苛的情况下可以使用。现在用NANODROP，一微升样品就够了。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
3楼2012-10-12 04:39:19
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-12 15:42:05
821078607: 金币+2, ★有帮助, 谢谢了 2012-10-14 22:36:46
用Nanodrop (Thermo) 测浓度，一次1ul即可；如果浓度很低(<10ng/ul)，Nanodrop可能测不准，就用Qubit (invitrogen) 吧，也是一次1-2ul
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4楼2012-10-12 08:30:14
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821078607

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbwalkman at 2012-10-11 22:12:18
我一般就是取10uL到60uL体系，测260和280；做转录的时候也用过5uL到100uL体系的，用于测量的我一般就不用了。稀释的话还要看你提的量的多少，一般池子的最小体积就是60uL。

你用这么小的池子，那计算公式还是使用的OD260*40*稀释倍数吗？因为溶液浓度相同时，用不同池子测出的OD值会不一样的
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5楼2012-10-12 09:17:32
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
821078607: 金币+10, ★有帮助, 谢谢了 2012-10-14 22:36:02
引用回帖:
5楼: Originally posted by 821078607 at 2012-10-12 09:17:32
你用这么小的池子，那计算公式还是使用的OD260*40*稀释倍数吗？因为溶液浓度相同时，用不同池子测出的OD值会不一样的...

恩恩 我们这一直用这么小的池子，每次我测的时候都是用一个池子，尽量保持一致啊。
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6楼2012-10-13 11:08:46
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821078607

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by bbwalkman at 2012-10-13 11:08:46
恩恩 我们这一直用这么小的池子，每次我测的时候都是用一个池子，尽量保持一致啊。...

我想请教一下那你用什么公式计算的浓度啊，谢谢！
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7楼2012-10-13 16:44:48
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 821078607 at 2012-10-13 16:44:48
我想请教一下那你用什么公式计算的浓度啊，谢谢！...

就是你之前写的这个公式大致计算一下RNA的浓度呢，
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8楼2012-10-13 17:19:40
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