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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有关DNA聚合内切前配置DNA的缓冲液问题
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jinggobia

铜虫 (正式写手)

[求助] 有关DNA聚合内切前配置DNA的缓冲液问题

因为我的实验中需要用到DNA聚合酶和DNA内切酶，反应条件是用NEBuffer2或4都可以，该缓冲液（1×）里有10mM Tris-HCl，50mM NACl，10mM氯化镁等物质，pH=7.9。
请问一下最开始买的粉末DNA需要用什么缓冲液配置，是Tris-HCl，PBS，还是水，是配到7.9就可以么，若使用10mM Tris-HCl配，会不会对实验过程聚合内切中缓冲液中的Tris-HCl浓度有影响从而影响反应效果么？
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1楼 2012-10-09 15:27:48
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jinggobia

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 青豆同学 at 2012-10-09 19:39:50
用水就可以 一样容的开的

非常感谢
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4楼2012-10-10 10:04:08
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shixiaba

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jinggobia: 金币+3, ★★★★★最佳答案 2012-10-10 10:03:44
DNA用灭菌水溶解就行，涉及反应的时候再加入缓冲。缓冲配置的时候要配成高浓度的，在反应体系中是1×就行了。
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2楼2012-10-09 16:04:47
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青豆同学

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用水就可以 一样容的开的
赞一下(1人) 回复此楼
谢谢你给我信心与力量，我会努力！
3楼2012-10-09 19:39:50
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