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weining1203新虫 (小有名气)
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[求助]
关于pET-32a表达的一些问题
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我的目的蛋白大概78Kd，使用pET-32a表达载体，酶切位点为sacI和Xhol， 上游引物 5G GAGCTC（SacI）ATGGTTGCAGCAGCAGAAAT3 下游引物 5CCG CTCGAG（Xhol）TCAGAATGGGCCAGGAGTTC3 设计的引物上游有起始密码子，下游有终止密码子，那么最终表达的蛋白到底有多大呢？求大神指点 |
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ypan
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【答案】应助回帖
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weining1203: 金币+8, ★有帮助 2012-10-12 20:12:09
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做SDS-PAGE大概的显示条带为90～100KDa. 在你的目的蛋白前面还有约170个氨基酸，包括Trx.TAG, S.TAG, His.TAG等蛋白序列。 核对pET-32a质粒图谱算出来。 |
weining12036楼2012-10-11 16:12:56
Marado
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
| ……你都说你目的蛋白78kd了，那你表达出来的应该就是78kd+HIS标签的大小. |
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2楼2012-10-09 15:13:15
weining1203
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